[发明专利]诊断磁珠的大规模制造方法及其生物应用

权利要求书

1.一种诊断磁珠的大规模制造方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)制备磁性交联聚维酮颗粒；

2)将所述的磁性交联聚维酮修饰多孔无机二氧化硅层以制备硅基磁性交联聚维酮颗粒；

3)将所述的硅基磁性交联聚维酮颗粒修饰有机硅层以制备双层硅基磁性交联聚维酮颗粒；

其中，所述制备磁性交联聚维酮颗粒包括如下步骤：

1-1)100-500质量份的粒径为5-20μm的交联聚维酮颗粒、200-500质量份的甘油、200-1000质量份的乙醇和200-1000质量份的水混合并机械搅拌0.5-1小时至分散；

1-2)通入氮气1小时后，加入100-200质量份的二价铁盐、200-400质量份的三价铁盐和10-100质量份的分散剂；

1-3)加入50-600质量份的弱碱性溶液，升温至40-70℃，反应2-10小时，降至室温得磁性交联聚维酮颗粒；

所述的交联聚维酮颗粒为含有吡咯烷酮结构的多孔状的结构的固体粉末颗粒；

所述的硅基磁性交联聚维酮颗粒的具体合成步骤如下：步骤1的反应器中继续加入100-500质量份的硅酸钠和100-600质量份的冰乙酸溶液，室温下继续搅拌1-5小时，以制备硅基磁性交联聚维酮颗粒；

所述双层硅磁性交联聚维酮颗粒的具体合成步骤包括：

3-1)继续在步骤2)中的反应器下加入20-400质量份的多元醇，室温搅拌1小时；

3-2)以流速为1-100mL/min的滴加速度，加入100-400质量份的有机硅源/乙醇混合物，滴加完毕后，继续在室温下搅拌反应2-10小时；

3-3)产物使用乙醇和去离子水反复沉淀清洗3-10次，在40-60℃鼓风干燥箱中烘干；

3-4)将产物加入DEPC处理的无菌水中，磁珠浓度配置为10-200mg/mL，以制备核酸提取磁珠悬浮液。

2.根据权利要求1所述的诊断磁珠的大规模制造方法，其特征在于，所述的二价铁盐为硫酸亚铁铵、氯化亚铁、硫酸亚铁和/或其组合，三价铁盐为氯化铁、硫酸铁、硝酸铁和/或其组合。

3.根据权利要求1所述的诊断磁珠的大规模制造方法，其特征在于，所述的分散剂为乙二胺四乙酸二钠、柠檬酸三钠、聚乙烯吡咯烷酮、吐温20、Brij 56、Brij 58、聚乙二醇辛基苯基醚、Span-80、Span-20、十二烷基肌氨酸钠、十二烷基硫酸锂、十六醇聚氧乙烯醚二甲基辛烷基氯化铵、辛烷基聚氧乙烯基十四烷基氯化铵、辛烷基聚氧乙烯基十二烷基氯化铵、聚乙二醇8000、聚乙烯亚胺和/或其组合。

4.根据权利要求1所述的诊断磁珠的大规模制造方法，其特征在于，弱碱性溶液为氨水、甲酰胺和/或其组合。

5.根据权利要求1所述的诊断磁珠的大规模制造方法，其特征在于，所述多元醇为聚乙二醇200、聚乙二醇400、聚乙二醇800、聚乙二醇1000、聚乙二醇8000、聚乙二醇10000、聚乙二醇20000、季戊四醇、三羟甲基乙烷、木糖醇、山梨醇、乙二醇、1，2-丙二醇、1，4-丁二醇、新戊二醇、二缩二乙二醇、一缩二丙二醇、三羟甲基丙烷、一缩二乙二醇和/或其组合；

所述的有机硅源为硅酸四乙酯、四(三甲基硅氧基)硅烷、硅酸四丁酯、四甲氧基硅烷、四丙氧基硅烷、正硅酸四异丙酯和/或其组合；有机硅源/乙醇混合物的质量比为1:1-1:5。

6.根据权利要求1所述的诊断磁珠的大规模制造方法，其特征在于，所述多元醇为聚乙二醇8000、季戊四醇、三羟甲基乙烷、一缩二乙二醇和/或其组合。

7.一种诊断磁珠的应用，其特征在于，所述的诊断磁珠为权利要求1-6任一项所述的诊断磁珠；所述诊断磁珠应用于新鲜动物组织、动物组织石蜡切片、植物叶片、植物种子、全血、血浆、血清、毛发、指甲、烟蒂、唾液、拭子、细菌或病毒等生物检材中的核酸提取及纯化。