[发明专利]一种水溶性荧光探针及其合成方法和用于检测抗生素的用途

说明书

本发明属于化学分析检测技术领域，具体介绍了一种水溶性荧光探针的合成方法以及用于检测抗生素的用途。本发明通过2.4‑二甲基吡咯、对甲酰基苯甲酸甲酯、三氟乙酸，DDQ，三乙胺，三氟化硼乙醚络合物等原料，在温和的反应条件下制得了荧光探针，并用于检测食品、环境等样品中的抗生素含量，如罗红霉素，四环素，土霉素。该检测方法具有灵敏度高，选择性好，检测时间短等优点。

技术领域

本发明属于化学分析检测技术领域，具体介绍了一种水溶性荧光探针及其合成方法和用于检测抗生素的用途。

背景技术

抗生素是一种生理活性物质，主要作用是抗细菌感染，可以杀灭和抑制侵入生物体内的致病性细菌，使感染得到有效控制，最终能使机体痊愈。抗生素的种类有很多，包括四环素类、大环内酯类、β内酰胺类等。土霉素(Oxytetracycline，OTC)和四环素(Tetracycline,TET)都属于四环素类抗生素，主要作为兽药用于动物感染性疾病治疗。罗红霉素是大环内酯类抗生素的一种，广泛应用于人体细菌感染疾病，对细菌感染引起的呼吸道感染，咽喉炎以及肺炎有很好的治愈效果。过量使用抗生素会导致在生物体内大量残留，机体造成严重的损伤。抗生素长期使用会导致病菌产生抗药性，引起生命体免疫能力下降，增加死亡率等。随着对环境保护以及健康问题逐渐重视，抗生素的检测越来越重要，抗生素的检测方法成为了重要的研究内容。

由于抗生素的含量相对较低，抗生素检测一般都是基于高灵敏度的大型仪器。主要包括色谱法及其联用技术、酶免疫分析法、毛细管电泳法、液相色谱-串联质谱法等。这些检测方法往往需要大型精密仪器且检测步骤复杂且繁琐，检测时间长，实用性差，需要专业的工作人员。因此，设计一种高效快速检测抗生素的方法就显得尤为重要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种水溶性荧光探针及其合成方法，并将其用于检测抗生素，简化复杂的抗生素检测技术。

一种水溶性荧光探针，以氟硼吡咯(BODIPY)为荧光检测基团，其结构如下：

一种水溶性荧光探针的合成方法，包括以下步骤：

(1)在氮气环境保护下，称取2.4-二甲基吡咯和对甲酰基苯甲酸甲酯溶于适量二氯甲烷，加入三氟乙酸，常温下充分搅拌，得混合液；

步骤(1)中，所述2.4-二甲基吡咯、对甲酰基苯甲酸甲酯的摩尔比例为2:1；2.4-二甲基吡咯和三氟乙酸的用量比例为4mmol：400μL；搅拌时间为12h。

(2)在步骤(1)的混合液中加入DDQ，反应搅拌一段时间，加入三乙胺，再充分反应一段时间，加入三氟化硼乙醚络合物，再反应一段时间即可停止反应；

步骤(2)中，所述DDQ、对甲酰基苯甲酸甲酯的摩尔比例为1:1；

三乙胺、三氟化硼乙醚络合物摩尔比例为1:1；

DDQ、三乙胺的摩尔比例为1:2；

加入DDQ后反应时间为3-5h，加入三乙胺后反应时间为20min，加入三氟化硼乙醚络合物后反应时间为12h。

(3)将步骤(2)得到的反应溶液用饱和食盐水洗涤，二氯甲烷萃取数次，收集有机相黄绿色溶液；

(4)将黄绿色溶液蒸发浓缩，硅胶柱层析分离，收集亮绿色荧光溶液并蒸发浓缩后，进行酸化处理得到目标产物水溶性荧光探针，COOH-BODIPY荧光探针。

步骤(4)中，所述硅胶柱层析分离时，采用的淋洗剂为石油醚和二氯甲烷的混合液，所述石油醚和二氯甲烷的体积比为4:1。

具体合成路线为：

本发明所述荧光探针用于检测抗生素方法，包括以下步骤：