[发明专利]一种三孢布拉氏霉全合成培养基及其应用、三孢布拉氏霉生产类胡萝卜素的方法

权利要求书

1.一种三孢布拉氏霉全合成培养基，其特征在于，所述三孢布拉氏霉全合成培养基包含氮源、碳源、无机盐和油脂；所述氮源中包含氨基酸：

所述氨基酸按质量浓度计包括如下组分：

2.根据权利要求1所述的三孢布拉氏霉全合成培养基，其特征在于，所述苏氨酸的质量浓度为4.0-10.5g/L。

3.根据权利要求1或2所述的三孢布拉氏霉全合成培养基，其特征在于，所述丙氨酸的质量浓度为1.5-3.0g/L。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的三孢布拉氏霉全合成培养基，其特征在于，所述三孢布拉氏霉全合成培养基中碳源的质量浓度为25-40g/L；

优选地，所述碳源选自葡萄糖、甘油或糖蜜中的任意一种或至少两种的组合，优选为葡萄糖；

优选地，所述三孢布拉氏霉全合成培养基中无机盐的质量浓度为0.6-14g/L；

优选地，所述无机盐选自磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钾、氯化钠、氯化钙或硫酸锌中的任意一种或至少两种的组合，优选为磷酸二氢钾、硫酸镁和氯化钾的组合；

优选地，所述无机盐按质量浓度计包括如下组分：

磷酸二氢钾 0.5-7g/L

硫酸镁 0.1-5g/L

氯化钾 0.01-2g/L。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的三孢布拉氏霉全合成培养基，其特征在于，所述三孢布拉氏霉全合成培养基中油脂的质量浓度为25-45g/L；

优选地，所述油脂选自植物油、动物油或微生物油脂中的任意一种或至少两种的组合，优选为植物油；

优选地，所述植物油选自葵花籽油、大豆油、花生油、玉米油、椰子油、棕榈油、棉籽油、米糠油、菜籽油、亚麻籽油或红花籽油中的任意一种或至少两种的组合，优选为葵花籽油。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的三孢布拉氏霉全合成培养基，所述三孢布拉氏霉全合成培养基按质量浓度计包括如下组分：

7.根据权利要求1-6中任一项所述的三孢布拉氏霉全合成培养基在制备类胡萝卜素中的应用；

优选地，所述类胡萝卜素包括β-胡萝卜素和/或番茄红素。

8.一种三孢布拉氏霉生产类胡萝卜素的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)斜面培养：取三孢布拉氏霉菌正菌和负菌的孢子悬液，分别涂布于斜面培养基上进行斜面培养；

(2)种子培养：取步骤(1)培养得到的三孢布拉氏霉菌正菌和负菌菌株，分别接种于种子培养基中进行培养，得到三孢布拉氏霉菌正菌种子液和三孢布拉氏霉菌负菌种子液；

(3)发酵培养：取步骤(2)培养得到的三孢布拉氏霉菌正菌种子液和三孢布拉氏霉菌负菌种子液混合，接种于权利要求1-6中任一项所述的三孢布拉氏霉全合成培养基中进行培养，得到含类胡萝卜素的三孢布拉氏霉发酵液。

9.根据权利要求8所述的三孢布拉氏霉生产类胡萝卜素的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述混合中，三孢布拉氏霉菌正菌种子液和三孢布拉氏霉菌负菌种子液的体积比为1:(3-15)。

10.根据权利要求8或9所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，得到的类胡萝卜素包含番茄红素，需在培养过程中添加阻断剂；

优选地，所述阻断剂的添加量为0.3-2g/L；

优选地，所述阻断剂选自咪唑、烟碱、吡啶或茶碱中的任意一种或至少两种的组合，优选为咪唑；

优选地，所述阻断剂的添加时间为培养开始后的18-48h，优选为24h。