[发明专利]一种提高灵芝多糖含量的灵芝菌丝体培养方法

说明书

本发明公开了一种提高灵芝多糖含量的灵芝菌丝体培养方法，包括制备灵芝菌丝体PDA种子、制备灵芝菌丝体液体种子和发酵培养灵芝菌丝体。其中发酵培养灵芝菌丝体具体为先制备发酵培养基并灭菌，然后在摇床中培养，培养条件：接种量4%、温度28℃、转速160rpm/min，先培养2.5天，后流加10g灭菌的黄豆粉，再培养两天结束发酵，收集灵芝菌丝体，并对灵芝菌丝体提取灵芝多糖。通过该方法获得的灵芝菌丝球较小、数量更多，发酵周期更短、灵芝多糖含量更高，显著降低了工业化生产成本、提高了企业的经济效益。

技术领域

本发明涉及灵芝多糖技术领域，特别是涉及一种提高灵芝多糖含量的灵芝菌丝体培养方法。

背景技术

灵芝（Ganoderma spp.）是中国最著名的药用真菌之一，它具有广泛的药理作用和极低的毒性，临床上可用于辅助治疗各种疾病，证明其具有抑制肿瘤、增强免疫、延缓衰老、保肝等功能。研究表明灵芝子实体和菌丝体组成没有明显的差别。传统上，灵芝是通过野外采集或人工栽培获得的。但灵芝子实体形成周期长，所需劳动强度大。随着液体深层发酵技术的发展，已可以对许多大型真菌进行大规模培养。

灵芝多糖是灵芝菌丝体中主要活性成分，已证明灵芝多糖具有抗肿瘤、免疫调节、降血脂、降血糖、抗氧化和抗衰老等作用功能。灵芝多糖主要是通过调节机体免疫功能而达到抗肿瘤目的。灵芝多糖的免疫调节作用是各种作用的基础,其免疫增强作用及免疫恢复作用的实现主要依赖于两个方面：一是对免疫细胞直接作用的结果；另一是通过机体神经一内分泌一免疫系统的相互调节作用的实现。灵芝多糖具有抗肿瘤、抗血栓及抗凝血的作用。

现有技术培养的灵芝菌丝体所获得的灵芝多糖含量不多，这显著影响了灵芝多糖的得率。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种提高灵芝多糖含量的灵芝菌丝体培养方法。通过该方法获得的灵芝菌丝球较小、数量更多，发酵周期更短、灵芝多糖含量更高，降低了工业化生产成本、显著提高了企业的经济效益。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种提高灵芝多糖含量的灵芝菌丝体培养方法，包括以下步骤：

（1）制备灵芝菌丝体PDA种子：首先将PDA培养基于120℃-125℃下灭菌30分钟，取豆粒大小的灵芝菌丝体接种在PDA培养基上，在28℃的恒温培养基中培养一周，收集PDA试管灵芝菌丝体种子，备用；

（2）制备灵芝菌丝体液体种子：制备液体种子培养基，然后于121℃下灭菌30分钟；将灵芝菌丝体PDA种子在无菌环境下接种在液体种子培养基中，在摇床中培养，培养条件：温度28℃、转速160rpm/min，培养时间5天；收集灵芝菌丝体液体种子，备用；

（3）发酵培养灵芝菌丝体：制备发酵培养基并灭菌，将灵芝菌丝体液体种子接种在发酵培养基中，在摇床中培养，培养条件为：温度28℃、转速160rpm/min；培养2.5天，然后流加10g灭菌的黄豆粉，在同样温度下继续培养两天，结束发酵，收集灵芝菌丝体。

进一步地，步骤（1）于123℃下灭菌30分钟。

进一步地，步骤（2）液体种子培养基配方为：酵母浸粉5 g，葡萄糖20g，蛋白胨5g,KH₂PO₄ 1g，MgSO₄·7H₂O 0.5 g，水1L。

进一步地，步骤（3）发酵培养基配方为：酵母浸粉5 g，葡萄糖 20g，蛋白胨5g，KH₂PO₄ 1g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，水1L。

进一步地，步骤（3）灵芝菌丝体液体种子在发酵培养基上的接种量为4%。

本发明的有益效果体现在：