[发明专利]一种牛血清白蛋白-茶多酚-钼纳米复合物及其应用

说明书

本发明提供一种牛血清白蛋白‑茶多酚‑钼纳米复合物，属于纳米医学领域。该复合物是将牛血清白蛋白溶解到水中，然后逐滴加入茶多酚水溶液和钼源水溶液，再逐滴加入氢氧化钠水溶液，采用生物矿化的方法反应，获得牛血清白蛋白‑茶多酚‑钼纳米复合物。本发明还提供牛血清白蛋白‑茶多酚‑钼纳米复合物在制备治疗引发癌细胞免疫原性细胞死亡与肿瘤免疫治疗药物中的应用。本发明的复合物具有良好的生物相容性，在水中分散性好，具有很好的引发小鼠癌细胞免疫原性细胞死亡的能力，能够有效的应用于肿瘤的免疫治疗中。

技术领域

本发明属于纳米医学领域，具体涉及一种牛血清白蛋白-茶多酚-钼纳米复合物及其应用。

背景技术

尽管科学家们在过去的几十年中在肿瘤治疗领域付出了巨大的努力，但是由于恶性肿瘤易于复发和转移，要完全消除恶性肿瘤仍然是一个严峻的挑战。近年来，免疫疗法已成为癌症治疗的热点，它是利用先天免疫系统产生抗肿瘤免疫力，为对抗肿瘤的复发和转移提供了新的机会。然而，根据初步的临床研究结果，由于肿瘤组织免疫原性低，并且肿瘤细胞可以通过免疫逃逸和免疫抑制来保护自身免受免疫系统的攻击，最终使得机体难以产生持续有效的免疫应答，因此当前的免疫治疗的效果远未达到预期。近年来，科学家们研究发现癌细胞的死亡可以是免疫原性的或非免疫原性的。除了直接细胞毒性，一些化疗药物还通过多种机制诱导随后的损伤相关分子模式的释放，如：钙网蛋白在细胞表面的暴露、三磷酸腺苷和高迁移率族蛋白B1的释放等。其中，暴露于癌细胞表面的钙网蛋白是免疫原性细胞死亡的独特生物标志物，对免疫原性细胞死亡诱导剂有反应的癌细胞将在凋亡前的阶段将钙网蛋白暴露于质膜外小叶上，并且分泌三磷酸腺苷以促进树突状细胞在凋亡过程中募集到肿瘤床中。暴露的钙网蛋白可充当“吞噬我”的信号，刺激树突状细胞吞噬即将死亡的癌细胞及其细胞碎片。此外，即将死亡的癌细胞会在此过程中释放出高迁移率族蛋白B1，这是许可宿主树突状细胞处理和呈递肿瘤抗原所必需的。钙网蛋白，三磷酸腺苷和高迁移率族蛋白B1可与树突状细胞相互作用，有利于招募树突状细胞到肿瘤床进而提高其激活细胞毒性T淋巴细胞的能力，最终增强毒性T淋巴细胞对肿瘤的攻击能力。通过引发肿瘤的免疫原性细胞死亡及其损伤相关分子模式的释放为肿瘤治疗提供了新的治疗依据和手段,有希望在未来提高对于肿瘤的临床治疗效果。

纳米科技为经济发展和科技进步带来了前所未有的机遇和挑战，随着基础理论研究的进步，纳米科技在生物技术领域也得到了普遍的研究和应用。最近，具有引发免疫原性细胞死亡的纳米材料已在抗肿瘤免疫治疗中取得了初步的成功。例如，南洋理工大学溥侃裔教授和他的同事们设计了有机半导体纳米颗粒作为免疫刺激剂，以诱导抗肿瘤免疫反应；中国科学技术大学王育才教授和他的同事们设计了一种在流态脂质体上自组装的金纳米颗粒用于第二红外区光热治疗，该疗法可以有效诱导免疫原性细胞死亡，同时释放损伤相关分子模式，触发先天和适应性免疫反应，使大部分小鼠在癌症疫苗接种实验中保持无肿瘤生长；苏州大学刘庄教授等人报道了几种“鸡尾酒”治疗配方，即通过混合免疫原性细胞死亡诱导的化学疗法和免疫佐剂以及藻酸盐进行局部化学免疫治疗；澳大利亚昆士兰大学余承忠教授等人报道了一种新的具有高效力和癌细胞特异性的联合免疫原性细胞死亡纳米诱导剂，以实现有效的癌症免疫治疗。因此，通过设计新型的、可引发免疫原性细胞死亡的纳米试剂将为肿瘤免疫治疗提供有希望的方向。

但是，目前仅有极少数的纳米材料获得美国食品及药物管理局批准用于临床人体研究，一方面是因为纳米材料的潜在毒性一直是一个值得探讨的话题。另一方面是由于纳米材料复杂的设计与制备过程也会为临床转化与应用增加难度。如何实现生物相容性好的纳米材料的高效量产是纳米医学一个亟待解决的难题。而基于白蛋白的生物矿化法是指利用牛血清白蛋白或者人血清白蛋白作为模板分子来指导无机纳米材料的合成的一种新兴的方法，该方法成本低、原料易得、生物相容性好，该技术目前也已经取得了广泛的应用。因此，开发基于生物矿化法的新型纳米试剂用于引发癌细胞的免疫原性细胞死亡具有重要的意义。