[发明专利]荧光定量PCR检测麻疹病毒、腮腺炎病毒和/或风疹病毒的方法

说明书

公开了核苷酸序列，其选自：SEQ ID NO：1；SEQ ID NO：2；SEQ ID NO：3；SEQ ID NO：7；SEQ ID NO：8；SEQ ID NO：9；SEQ ID NO：16；SEQ ID NO：17；以及SEQ ID NO：18。

领域

本公开大体上涉及生物技术领域，更具体地，本公开涉及荧光定量PCR检测领域。

背景

麻疹、腮腺炎和风疹(以下简称“麻腮风”)是由麻疹病毒、腮腺炎病毒和风疹病毒引起的重要病毒性传染病，上述三个疾病均为儿童急性传染病，对儿童的健康危害最大，被列入法定新发传染病名单中。据国家卫生健康委员会官方数据统计，近年来每年新发病例数合计均在二十万例以上，其中腮腺炎的占比最高。

疫苗免疫是预防麻腮风的重要措施。上世纪60年代开始，随着生物技术和人们对于麻腮风的深入了解，陆续开发出相关减毒活疫苗预防该病，并取得良好的效果。由于3种疾病的接种群体和其他特性的原因，加之使用方便等原因，又进一步开发出麻腮风三联活疫苗，并占据了市场的主导地位。

概述

一方面，本公开涉及核苷酸序列，其选自：SEQ ID NO:1；SEQ ID NO:2；SEQ ID NO:3；SEQ ID NO:7；SEQ ID NO:8；SEQ ID NO:9；SEQ ID NO:16；SEQ ID NO:17；以及SEQ IDNO:18。

另一方面，本公开涉及探针，其选自：Cy5-SEQ ID NO:3-BHQ2；FAM-SEQ ID NO:9-BHQ2；以及VIC-SEQ ID NO:18-BHQ1。

再一方面，本公开涉及荧光定量PCR检测麻疹病毒的方法，其包括使用SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2作为引物，以及使用Cy5-SEQ ID NO:3-BHQ2作为探针。

又一方面，本公开涉及荧光定量PCR检测腮腺炎病毒的方法，其包括使用SEQ IDNO:7和SEQ ID NO:8作为引物，以及使用FAM-SEQ ID NO:9-BHQ2作为探针。

另一方面，本公开涉及荧光定量PCR检测风疹病毒的方法，其包括使用SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:17作为引物，以及使用VIC-SEQ ID NO:18-BHQ1作为探针。

再一方面，本公开涉及荧光定量PCR检测麻疹病毒、腮腺炎病毒和风疹病毒的方法，其包括使用SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:16和SEQ ID NO:17作为引物，以及使用Cy5-SEQ ID NO:3-BHQ2、FAM-SEQ ID NO:9-BHQ2和VIC-SEQ ID NO:18-BHQ1作为探针。

又一方面，本公开涉及检测麻疹病毒的方法，其包括：采用单层接种或混种接种的方式将细胞接种麻疹病毒；用低渗PBS裂解接种后的细胞将麻疹病毒从所述接种后的细胞中释放；以及使用荧光定量PCR检测麻疹病毒，其中使用SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2作为引物，以及使用Cy5-SEQ ID NO:3-BHQ2作为探针。

另一方面，本公开涉及检测腮腺炎病毒的方法，其包括：采用单层接种或混种接种的方式将细胞接种腮腺炎病毒；用低渗PBS裂解接种后的细胞将腮腺炎病毒从所述接种后的细胞中释放；以及使用荧光定量PCR检测麻腮腺炎毒，其中使用SEQ ID NO:7和SEQ IDNO:8作为引物，以及使用FAM-SEQ ID NO:9-BHQ2作为探针。