[发明专利]一种提高重组柯萨奇病毒溶瘤作用的方法

说明书

本发明涉及及生物制品制备技术领域，具体公开了一种提高重组柯萨奇病毒溶瘤作用的方法，病毒经细胞培养纯化后，将细菌脂多糖(LPS)作为协同剂加入病毒体系可以有效提肿瘤细胞出现病变效应，从而提升柯萨奇病毒的溶瘤作用，扩大柯萨奇病毒用于治疗肿瘤的用途。

技术领域

本发明属于生物制品制备技术领域，具体涉及一种提高重组柯萨奇病毒溶瘤作用的方法。

背景技术

柯萨奇病毒(Coxsacie virus，CV)为1948年Gillbert Dalldorf博士和他的同事在寻找治愈脊髓灰质炎疾病的过程中在粪便样品中首次获得，因在纽约柯萨奇小镇发现而得名。同其他类型肠道病毒相同，柯萨奇病毒可通过粪－口途径和口－口途径传播。其中，接触感染者粪便污染的水、食物及土壤可以导致粪－口途径传播。一般情况下，婴幼儿大多隐性感染；而5岁以下，尤其是3岁以下儿童，排毒时间可长达一个月。病毒感染人体后，可引起上呼吸道感染、急性心肌炎等疾病，对婴幼儿的健康造成严重威胁。

柯萨奇病毒B组通常引起轻微的类似感冒样的疾病，有时也可以引起心脏、胰腺或中枢神经系统的严重病变，尤其是在新生儿、幼童和免疫缺陷的成人。如在孕晚期宫内感染或围产期感染可以导致严重的致死性疾病如新生儿心肌炎、脑膜炎、脑炎、肝炎等。

随着全基因组序列测序技术的发展，越来越多的CVB3病毒株的基因组氨基酸序列的测序已经完成。研究发现，不同的CVB3病毒株其基因组上某些碱基改变会导致它们编码的蛋白质的结构和功能完全不同，从而毒力也不同。病毒株CVB3/20、CVB328、CVB3AS和CVB/Nancy可以引起心肌炎和胰腺炎，病毒CVB3CO只引起胰腺炎，而CVB3GA、CVB3/0不引起疾病。

中国专利公开文献CN103981152A公开了一种柯萨奇病毒，所述柯萨奇病毒为柯萨奇病毒B组3型变异株，其基因组2690位点为腺嘌呤且基因组3231位点为鸟嘌呤。所述柯萨奇病毒具有显著的溶细胞能力和选择特异性，能应用于抗肿瘤药物的制备。

细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁外壁的组成成分，是由脂质和多糖构成的物质(糖脂质)。脂多糖存在于覆盖全身的外膜(脂质双分子层)的细胞外侧的脂质中。在LPS的生理活性表现中被认为起到最重要作用的是类脂A部分，类脂A可以单独体现其生理作用。LPS作为肠道微生物细胞壁成分，可能存在对于肠道病毒属类病毒的协同作用，然而，现有技术目前尚未对此作出研究。

因此有必要针对LPS可能存在的协同作用，研究LPS对于柯萨奇病毒溶瘤作用，从而扩大LPS的应用范围，并提升现有技术柯萨奇病毒溶瘤效力。

发明内容

鉴于此，本发明的目的在于提供一种提高重组柯萨奇病毒溶瘤作用的方法，从而扩大LPS的应用范围，并提升现有技术柯萨奇病毒溶瘤效力。

为解决上述问题，本发明方案如下：

本发明提出LPS在制备溶瘤药物中的应用，所述药物包括柯萨奇病毒CVB3-A。

进一步地，所述LPS浓度为50-1000μg/ml。

根据本发明的实施例，所述LPS浓度为50μg/ml、100μg/ml、500μg/ml、1000μg/ml。

优选地，所述LPS浓度为500μg/ml。

根据本发明的实施例，本发明所述溶瘤药物中所述柯萨奇病毒CVB3-A剂量为10⁹PFU。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

本发明提出LPS对于柯萨奇病毒溶瘤作用，从而扩大LPS的应用范围，并提升柯萨奇病毒溶瘤效力，并且在500μg/ml浓度效果最好，可以增强20％的溶瘤效力。

具体实施方式