[发明专利]一种提高重组柯萨奇病毒稳定性的方法

说明书

本发明涉及及生物制品制备技术领域，具体公开了一种提高重组柯萨奇病毒稳定性的方法，将细菌脂多糖(LPS)作为保护剂加入病毒保存体系可以有效提升柯萨奇病毒的热稳定性，可以方便柯萨奇病毒的运输和保藏，为柯萨奇病毒的研究提供更多便利。

技术领域

本发明属于生物制品制备技术领域，具体涉及一种提高重组柯萨奇病毒稳定性的方法。

背景技术

细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁外壁的组成成分，是由脂质和多糖构成的物质(糖脂质)。脂多糖存在于覆盖全身的外膜(脂质双分子层)的细胞外侧的脂质中。在LPS的生理活性表现中被认为起到最重要作用的是类脂A部分，类脂A可以单独体现其生理作用。

LPS很难从细胞壁脱落，当细菌死亡等时它会通过溶解、破坏细胞来脱落。LPS具有热稳定性和化学稳定性，用一般的高压灭菌器或干热灭菌法是无法让其灭活的。要想让其灭活就需要用250℃的高温加热30分钟。

热稳定性是流感病毒的固有生物学特性,主要由病毒的血凝素蛋白决定,并且与环境温度、pH、盐度、空气湿度和界面性质等理化因素密切相关,在病毒进化与传播过程中发挥重要作用。

柯萨奇病毒(Coxsacie virus，CV)为1948年Gillbert Dalldorf博士和他的同事在寻找治愈脊髓灰质炎疾病的过程中在粪便样品中首次获得，因在纽约柯萨奇小镇发现而得名。同其他类型肠道病毒相同，柯萨奇病毒可通过粪—口途径和口—口途径传播。其中，接触感染者粪便污染的水、食物及土壤可以导致粪—口途径传播。一般情况下，婴幼儿大多隐性感染；而5岁以下，尤其是3岁以下儿童，排毒时间可长达一个月。病毒感染人体后，可引起上呼吸道感染、急性心肌炎等疾病，对婴幼儿的健康造成严重威胁。

柯萨奇病毒具备RNA病毒的共性，由于其结构简单、稳定性差，突变更快，进而为诊断试剂的研发和治疗药物的研发带来极大的挑战；此外柯萨奇病毒的热稳定性差，不便于运输和保藏，给病毒的研究带来诸多不便。

基于现有技术中存在的技术问题，因此有必要提出一种提高重组柯萨奇病毒热稳定性的方法。

发明内容

鉴于此，本发明的目的在于提供一种提高重组柯萨奇病毒稳定性的方法，解决现有技术中柯萨奇病毒的热稳定性差，不便于运输和保藏的问题。

为解决上述问题，本发明方案如下：

本发明提出LPS在柯萨奇病毒B3保存试剂盒中的应用。进一步地，所述应用中，LPS作为保护剂提高柯萨奇病毒B3的热稳定性。

根据本发明的实施例，所述LPS浓度为50-1000μg/ml；优先为50μg/ml、100μg/ml、500μg/ml、1000μg/ml；更优选地，所述LPS浓度优选500μg/ml。

本发明还有一个目的在于，提出一种提高重组柯萨奇病毒稳定性的方法，步骤包括，将病毒经细胞培养、纯化后与LPS混育保存，所述病毒为柯萨奇病毒B3。进一步地，所述LPS浓度为50-1000μg/ml；优选为500μg/ml。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

本发明提出LPS可用于提高重组柯萨奇病毒热稳定性，并且在500μg/ml浓度下热稳定性更好，可以作为病毒保存试剂盒用于病毒的运输和保藏，给病毒的研究带来极大的方便。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为本发明LPS条件下热处理对柯萨奇病毒活力与未加LPS的对比结果示意图。