[发明专利]一种高效层析分离纯化紫杉醇的方法

权利要求书

1.一种高效层析分离纯化紫杉醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：将硅胶加入洗脱溶剂中，搅拌均匀，然后倾倒入层析柱内；

S2：关闭层析柱底部阀门，使硅胶沉降5～10小时；

S3：沉降之后将层析柱底部阀门打开，当层析柱内液面刚好和硅胶平面齐平时关闭阀门，层析柱准备完毕；

S4：将紫杉醇粗品加入洗脱溶剂中，水浴加热并搅拌至紫杉醇粗品完全溶解得到样品；

S5：将样品缓慢倾倒入步骤S3中准备好的层析柱内，当样品溶液全部进入硅胶后，加入洗脱溶剂开始层析分离；

S6：调整层析柱底部阀门开度，控制层析液流出速率，收集多个流份，流份用HPLC检测；

S7：合并合格流份，将流份浓缩至干，得紫杉醇粗品H；

S8：将紫杉醇粗品H加入甲醇溶液，水浴加热搅拌至完全溶解，冷却至室温，然后进行第一次冷冻结晶产生少量结晶颗粒，将料液搅拌均匀，进行第二次冷冻结晶，再次搅拌均匀，进行第三次冷冻结晶，过滤得到滤饼；

S9：将滤饼干燥得到紫杉醇产品。

2.根据权利要求1所述的一种高效层析分离纯化紫杉醇的方法，其特征在于：所述洗脱溶剂的组份包括二氯甲烷、乙酸乙酯和异丙醇，所述二氯甲烷：乙酸乙酯：异丙醇＝91:6:1。

3.根据权利要求2所述的一种高效层析分离纯化紫杉醇的方法，其特征在于：所述步骤S1中，硅胶的大小为200～300目，重量为30～35kg，洗脱溶剂加入量为60～65kg。

4.根据权利要求2所述的一种高效层析分离纯化紫杉醇的方法，其特征在于：所述步骤S4中，紫杉醇粗品重量为600～1000g，含量为50～70％，洗脱溶剂加入量为1200～1800ml。

5.根据权利要求1所述的一种高效层析分离纯化紫杉醇的方法，其特征在于：所述步骤S4和步骤S8中，水浴温度为52～56℃。

6.根据权利要求1所述的一种高效层析分离纯化紫杉醇的方法，其特征在于：所述步骤S6中，控制层析液流出速率为20±1L/h，每10L为1个流份，收集20个流份，然后用HPLC对每个流份进行检测。

7.根据权利要求1所述的一种高效层析分离纯化紫杉醇的方法，其特征在于：所述步骤S7中，用旋转蒸发仪在温度60℃，真空度-0.03MPa～-0.085MPa浓缩至干，得到的紫杉醇粗品重量为400～420g，紫杉醇含量为98.4％～98.7％。

8.根据权利要求1所述的一种高效层析分离纯化紫杉醇的方法，其特征在于：所述步骤S8中，甲醇加入量为4900～5000mL，冷冻结晶的温度为-25℃，第一次冷冻结晶时间为2～3小时，第二次冷冻结晶时间为1.8～2.4小时，第三次冷冻结晶时间为45～50小时。

9.根据权利要求1所述的一种高效层析分离纯化紫杉醇的方法，其特征在于：所述滤饼的干燥温度为58～65℃，干燥时长35～40小时。