[发明专利]牛副流感病毒和牛呼吸道合胞体病毒双重RPA检测试剂盒有效
申请号: | 202011602492.3 | 申请日: | 2020-12-29 |
公开(公告)号: | CN112593013B | 公开(公告)日: | 2022-07-05 |
发明(设计)人: | 赵晓民;童德文;王凯丽;刘丹 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 范巍 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 流感病毒 呼吸道 合胞体 病毒 双重 rpa 检测 试剂盒 | ||
1.一种牛副流感病毒和牛呼吸道合胞体病毒的双重RPA检测引物组,其特征在于:该RPA检测引物组包括牛副流感病毒反转录本扩增引物对P1以及牛呼吸道合胞体病毒反转录本扩增引物对P2;
所述引物对P1的核苷酸序列为:
上游引物F2:5'-GAGTATGATCAAGACAATATGTTGCAAAATGG-3'
下游引物R3:5'-CTGATTGTGTTGAAAAATGAAGCAAGACCTG-3';
所述引物对P2的核苷酸序列为:
上游引物F'3:5'-GGAGGTAGTAGGGTAGAAGGAATCTTTGCAGGG-3'
下游引物R'2:5'-CTCCACCTAACTTTTGTGCATATTCATAGACTTC-3'。
2.一种牛副流感病毒和牛呼吸道合胞体病毒的双重RPA检测试剂盒,其特征在于:该试剂盒包括RPA检测引物组;所述RPA检测引物组包括牛副流感病毒反转录本扩增引物对P1以及牛呼吸道合胞体病毒反转录本扩增引物对P2;
所述引物对P1的核苷酸序列为:
上游引物F2:5'-GAGTATGATCAAGACAATATGTTGCAAAATGG-3'
下游引物R3:5'-CTGATTGTGTTGAAAAATGAAGCAAGACCTG-3';
所述引物对P2的核苷酸序列为:
上游引物F'3:5'-GGAGGTAGTAGGGTAGAAGGAATCTTTGCAGGG-3'
下游引物R'2:5'-CTCCACCTAACTTTTGTGCATATTCATAGACTTC-3'。
3.根据权利要求2所述的双重RPA检测试剂盒,其特征在于:所述RPA检测引物组中,引物的工作浓度为5~20 μM。
4.根据权利要求3所述的双重RPA检测试剂盒,其特征在于:所述RPA检测引物组中,根据扩增片段的大小差异,扩增片段较小的引物对P2在建立的RPA扩增反应体系中的含量大于扩增片段较大的引物对P1在该反应体系中的含量。
5.根据权利要求3所述的双重RPA检测试剂盒,其特征在于:所述RPA检测引物组中,F2:R3:F'3:R'2的用量体积比为(1.1~1.2):(1.1~1.2):(1.2~1.3):(1.2~1.3)。
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