[发明专利]多肽、其组合物、包含其的试剂盒及其应用

说明书

本发明提供了一种多肽、其组合物、包含其的试剂盒及其应用。其中多肽能够特异性结合IA2A、GADA和IAA中的任意一种自身抗体；结合IA2A的多肽选自SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：10中的任意一条或多条；结合GADA的多肽选自SEQ ID NO：11至SEQ ID NO：20中的任意一条或多条；结合IAA的多肽选自SEQ ID NO：21至SEQ ID NO：25中的任意一条或多条。上述多肽能够特异性地与自身抗体结合，应用时采用针对一种抗体的一条或多条多肽进行检测，或采用针对多个抗体的多条多肽进行检测，即可通过综合判断多条多肽的检测结果来判定自身抗体状况，因而检测准确性更高。

技术领域

本发明涉及自身抗体检测产品领域，具体而言，涉及一种多肽、其组合物、包含其的试剂盒及其应用。

背景技术

自身免疫病是一类由于免疫功能紊乱，机体产生针对自身抗原的病理性免疫应答，而引起组织、器官或系统损失的疾病。常见的病因有机体内出现自身抗原，免疫调节异常，存在交叉抗原和遗传因素等。临床表现复杂多变，且病变累及广泛。自身免疫病根据累及的范围主要分为器官特异性自身免疫病和系统性自身免疫病。器官特异性自身免疫病是指组织器官的病理损害和功能障碍，仅限于抗体或致敏淋巴细胞所针对的某一器官，如慢性淋巴细胞性甲状腺炎、甲状腺功能亢进、胰岛素依赖型糖尿病、重症肌无力、溃疡性结肠炎、恶性贫血伴慢性萎缩性胃炎、肺出血肾炎综合征、寻常天疱疮、类天疱疮、原发性胆汁性肝硬化、多发性脑脊髓硬化症、急性特发性多神经炎等。系统性自身免疫病是由于抗原抗体复合物广泛沉积于血管壁等原因导致全身多器官损害的系统性自身免疫病。习惯上又被称之为胶原病或结缔组织病，主要是由于免疫损伤导致血管壁及间质的纤维素样坏死性炎症及随后产生多器官的胶原纤维增生所导致的。常见的系统性自身免疫病有：系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、系统性血管炎、硬皮病、天疱疮、皮肌炎、混合性结缔组织病、自身免疫性溶血性贫血等。

目前临床医生对自身免疫病的诊断主要根据患者的临床表现，并结合检测血清或血浆中一种或多种高效价特异性抗体来确定。由于自身免疫病的潜伏期长，许多自身抗体检测可以在自身免疫病发生前2-3年即出现异常。因此自身抗体的检测对自身免疫病的早诊断，早预防，早发现，早治疗具有重要的意义。自身免疫病常用的检测方法众多，除传统的沉淀反应，凝集试验、补体结合试验以外，标记免疫测定，如酶联免疫测定、放射免疫测定、荧光免疫测定、发光免疫测定等已成为主要的免疫测定技术，免疫印迹法和快速斑点免疫结合试验也被广泛使用。

自身免疫病以自身免疫性糖尿病为例，如一型糖尿病(T1DM)和成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)，该类疾病主要是由于免疫系统功能失常，产生自身抗体，并选择性地攻击胰岛β细胞，从而最终需要胰岛素治疗。由于LADA患者的临床表现和代谢特性与二型糖尿病(T2DM)患者相似，短时间内不需要胰岛素治疗，使得这些患者在患病初期容易被误诊为T2DM，误诊率高达5-10％。理想情况下，新诊断为T2DM的患者应该进行血浆C肽和自身抗体筛查，以确保对自身抗体呈阳性的患者能够正确用药，并进行更密切的监测。但是出于价格、检测灵敏度和准确性等原因，目前相关检测很难得到广泛推广。

此外，LADA疾病进程中，自身抗体出现的阶段和类别存在个体差异，需要对不同抗体进行多次实验。通常认为GADA抗体是目前最敏感的T1DM和LADA的自身抗体标记物，不受疾病发病时的年龄影响。其他自身抗体一般与发病年龄负相关的，如IAA更容易出现在年轻的T1DM患者中，而IA2A和ZnT8 Ab则只存在于一小部分LADA患者中。同时也存在低滴度的GADA自身抗体，或单一胰岛细胞自身抗体呈阳性的LADA患者。更重要的是，目前发现一部分表型为T2D的患者表现出了自身免疫T细胞响应，却检测不到已知的自身抗体。说明这部分LADA患者可能存在目前未知的自身抗体。这些都对LADA患者体内自身抗体检测和LADA精准诊断带来不小的挑战。相比于传统的T1DM，自身免疫过程在LADA中的进展相对缓慢，治疗方案需要偏向于防止胰岛β细胞功能丧失与衰亡。

因此，针对上述临床检测需求，需要提供新的能够对自身抗体进行检测的产品。

发明内容