[发明专利]一种枯草芽孢杆菌植物生长促进剂的制备方法

权利要求书

1.一种枯草芽孢杆菌植物生长促进剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一：将此植物根际促生菌剂接种至含10-20克的NB培养基，pH值控制在7.4±0.2，经液态摇瓶培养20-36小时，直至每毫升枯草芽孢杆菌营养细胞浓度达到10^8 cfu/ml以上，作为一级种子发酵液并存放于种子罐中，维持罐压0.03-0.05MPa；

步骤二：二级发酵培养：以接种量5-10%的体积量，将种子罐中的发酵液抽取至二级发酵罐进行二级培养，培养基中含有葡萄糖2%、糖蜜0.5%、酵母抽出物0.3 %、蛋白胨0.5%、豆粉3%以及磷酸二氢钾0.1%，培养液量为罐体体积的65%，发酵培养时通入无菌空气，通气量控制在1：0.3-1.0vvm，转速控制在150-200 rpm，pH值控制在6.5-7.5，维持罐压0.03-0.05MPa，温度控制在30-37℃，培养48-72小时；

步骤三：三级发酵培养：以接种量5-10%的体积量，将二级发酵罐中的发酵液抽取至三级发酵罐进行三级培养，培养基中含有葡萄糖0.5%、蔗糖1%、麦芽糊精1%、大豆蛋白2% 、磷酸二氢钾0.3%以及硫酸镁0.3%，并将初始pH值控制在6.5，发酵培养时通入无菌空气，通气量控制在1：1.0-2.0 vvm，转速控制在300-500rpm，pH值控制在6.0以上，维持罐压0.03-0.05MPa温度控制在30-37℃；

步骤四：在三级培养期间，定期抽样检测菌数活性、转孢情况、pH值以及伊枯草菌素浓度等参数，直至伊枯草菌素达到300ppm、转孢率在80%以上、草芽孢杆菌营养细胞浓度达到10^9 cfu/ml以上即停止发酵；

步骤五：将菌液进行喷雾干燥，干燥完成后，包装成成品，完成制备。

2.根据权利要求1所述的一种枯草芽孢杆菌植物生长促进剂的制备方法，其特征在于：在喷雾干燥前先添加30%的海藻糖、蔗糖、玉米淀粉复合型喷雾干燥保护剂。

3.根据权利要求1所述的一种枯草芽孢杆菌植物生长促进剂的使用方法，其特征在于：在使用时以成品的0.2%兑水，在定植前后、植物生长期间或病害发生初期，通过灌根、叶面喷洒或者与栽培基质混合等方式施用。