[发明专利]一种糜子基因分子标记在鉴定糜子产量相关性状中的应用

说明书

本发明属于农业技术领域，公开了一种糜子基因分子标记在鉴定糜子产量相关性状中的应用，包括设计PCR引物，用PCR方法进行检测；进行亲本选择，并杂交得到F1代种子；将F1代种子种植成苗，收获F2代种子，将F2代种子播种，收获杂交子代；抽提杂交子代不同生长发育阶段的叶片组织中的总DNA及总RNA进行分子鉴定；将得到的含有所述分子标记的杂交后代自交多代得到优选的杂交子代；将得到的优选杂交子代通过组织培养的方式进行无性扩繁以及组培苗的培育、筛选，并进行性状鉴定。本发明能够有效的选育糜子的优异产量性状品种；为糜子分子标记辅助选择育种提供了一个新的方法，在培养高产量糜子品种或研究中具有重要意义。

技术领域

本发明属于农业技术领域，尤其涉及一种糜子基因分子标记在鉴定糜子产量相关性状中的应用。

背景技术

目前：糜子(Panicum miliaceumL.)属禾本科黍属，又称黍、稷，其脱皮后的产物一般称为黄米；至今已有一万年的栽培历史，在中国分布广泛，种质资源十分丰富，目前已收集保存8000多份。糜子生育期短，耐旱、耐瘠薄，多属粳糯两类，是重要的抗灾作物；中国的糜子栽培面积约100万hm 2，居世界第二位，在国民经济发展中具有非常特殊的作用。糜子所含营养非常丰富，糜子籽粒含量中8.6％-15.5％为蛋白质，2.6％-6.9％为脂肪，67.6％-75.1％为淀粉，3.5％-4.4％为膳食纤维，1.3％-4.3％为灰分。糜子籽粒蛋白质含量在小米、大米、玉米、高粱米、糜子、大麦和青稞中最高。糜子籽粒脂肪含量与玉米、糜子和高粱相近，高于大米、糜子。糜子籽粒淀粉含量与小米、大米等相近，其中糯性糜子直链淀粉含量在3.7％以下，优质糯性糜子籽粒不含直链淀粉，粳性糜子籽粒直链淀粉含量在4.5％-12.7％之间。糜子籽粒中大量元素有钾、镁、钙、磷等和微量元素有铁、铜、锌、硒等，其中磷、铁含量较大米和糜子高。此外，糜子籽粒中维生素含量也十分丰富的，其中核黄素、硫胺素和维生素E的含量都较大米和糜子高。

利用各种途径来提高糜子产量成为包括育种家在内的许多科学家的主要目的之一。传统的通过表型筛选的育种模式耗时和费力，而功能标记的开发为糜子育种过程中选育优异株系提供了更为方便快捷的方法。随着分子生物技术的发展，重要基因的功能不断被揭示，在作物遗传改良中高效利用这些基因已成为基因发掘的重要目标。分子标记辅助选择技术为提高目标性状选择效率，改良作物提供了一条新的有效途径。

通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：现有的糜子育种方法费时费力，且现有技术中并无通过分子标记进行糜子育种的方法。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种糜子基因分子标记在鉴定糜子产量相关性状中的应用。

本发明是这样实现的，一种糜子基因分子标记在鉴定糜子产量相关性状中的应用，所述糜子基因分子标记在鉴定糜子产量相关性状中的应用包括以下步骤：

步骤一，选择与糜子优良产量性状相关的基因或基因簇的保守区域，或是包含有与糜子优良产量性状相关的基因或基因簇的活性关键位点的区域，并依据选取的区域分别设计PCR引物，进行PCR检测；

所述依据选取的区域分别设计PCR引物，进行PCR检测，具体为：

对糜子基因组DNA进行提取；

进行糜子基因插入位点左边界旁邻序列的扩增和确认，得到糜子基因组定性PCR扩增引物对；

利用TAIL-PCR方法进行PCR扩增；

所述利用TAIL-PCR方法进行PCR扩增的反应体系为：

第一轮反应：总体积15μL，2μL 1×PCR缓冲液，1μL 2mM dNTPs，0.2μL 5U Taq DNA聚合酶，11.8μL灭菌去离子水；