[发明专利]一种植物抗逆性延续筛选方法在审
申请号: | 202011611387.6 | 申请日: | 2020-12-30 |
公开(公告)号: | CN112690127A | 公开(公告)日: | 2021-04-23 |
发明(设计)人: | 许力;高茜;米其利;蒋佳芮;杨文武;向海英;曾婉俐;李雪梅;杨光宇;刘馨芮彤;邓乐乐;张建铎 | 申请(专利权)人: | 云南中烟工业有限责任公司 |
主分类号: | A01G7/00 | 分类号: | A01G7/00;A01G7/06;A01G22/00;A01C1/08 |
代理公司: | 北京维澳专利代理有限公司 11252 | 代理人: | 曾晨;王立民 |
地址: | 650231 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 植物 抗逆性 延续 筛选 方法 | ||
1.一种植物抗逆性延续筛选方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤(1):将待测植物种子进行表面消毒后,点种于培养基中培养至露白及生长成具有2片真叶的十字期;
步骤(2):将挑选出的露白的种子移至添加有胁迫剂的培养基中,在培养温度为25±1℃,光照强度为30-50μmol/(m2·s),光照时间为16h/d的条件下培养12-25d;
步骤(3):获取添加有胁迫剂的培养基培养的植物种子的根长、叶片尺寸及叶色,以得到植物种子萌发期的抗逆性;
步骤(4):将挑选出处于十字期的种子移栽至含有基质土的培养基中,在培养温度为25±1℃,光照强度为30-50μmol/(m2·s),光照时间为16h/d的条件下培养7-15d,得到植株幼苗;
步骤(5):对植株幼苗进行浇灌盐溶液处理或干旱处理,获取抗逆性指标,以得到植物幼苗的抗逆性;
步骤(6):挑选所述步骤(4)中得到的植株幼苗继续培养至特定生长时期,对特定生长时期的植株进行与所述步骤(5)中相同的抗逆性试验,获取抗逆性指标,以得到特定生长时期的植株的抗逆性。
2.根据权利要求1所述的植物抗逆性延续筛选方法,其特征在于,所述步骤(1)中的表面消毒的具体步骤如下:
先采用无菌水清洗待测植物种子,再采用体积百分含量75%的酒精对待测植物种子的表面消毒,接着采用无菌水清洗,然后采用质量百分含量1%的硝酸银溶液对待测植物种子的表面消毒,最后采用无菌水清洗,并置于灭菌的滤纸上吸干水分。
3.根据权利要求2所述的植物抗逆性延续筛选方法,其特征在于,所述步骤(1)中的表面消毒的具体步骤如下:
先采用无菌水清洗待测植物种子2次,再采用体积百分含量75%的酒精对待测植物种子的表面消毒45s,接着采用无菌水清洗1次,然后采用质量百分含量1%的硝酸银溶液对待测植物种子的表面消毒10min,最后采用无菌水清洗4-5次,并置于灭菌的滤纸上吸干水分。
4.根据权利要求1所述的植物抗逆性延续筛选方法,其特征在于,所述步骤(2)中的培养基包括MS培养基。
5.根据权利要求4所述的植物抗逆性延续筛选方法,其特征在于,所述步骤(2)中的胁迫剂为氯化钠,胁迫剂的浓度包括100mmol/L、150mmol/L和200mmol/L。
6.根据权利要求4所述的植物抗逆性延续筛选方法,其特征在于,所述步骤(2)中的胁迫剂为PEG6000,胁迫剂的质量百分含量包括5%、7%和10%。
7.根据权利要求1所述的植物抗逆性延续筛选方法,其特征在于,所述步骤(2)中的培养为垂直放置培养。
8.根据权利要求1所述的植物抗逆性延续筛选方法,其特征在于,所述步骤(5)中的浇灌盐溶液处理或干旱处理的强度小于所述步骤(6)中同种抗逆性试验的强度。
9.根据权利要求1所述的植物抗逆性延续筛选方法,其特征在于,所述步骤(5)和所述步骤(6)中的抗逆性指标包括脯氨酸含量、丙二醛含量、POD活性及含量和可溶性糖含量。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的植物抗逆性延续筛选方法,其特征在于,所述步骤(3)具体如下:
步骤(3-1):获取添加有胁迫剂的培养基培养的待测植物种子的根长、叶片尺寸及叶色;
步骤(3-2):获取添加有胁迫剂的培养基培养的抗逆性已知的植物种子的根长、叶片尺寸及叶色;
步骤(3-3):比较添加有胁迫剂的培养基培养的待测植物种子的根长、叶片尺寸及叶色和添加有胁迫剂的培养基培养的抗逆性已知的植物种子的根长、叶片尺寸及叶色,根据区别由大至小对根长、叶片尺寸及叶色进行排序,并由根长、叶片尺寸及叶色获取根系参数、叶片参数及叶色参数;
步骤(3-4):通过第一调整系数、第二调整系数和第三调整系数分别对排序后的根长、叶片尺寸及叶色所对应的根系参数、叶片参数及叶色参数进行处理,得到抗逆值,其中,第一调整系数、第二调整系数和第三调整系数逐渐减小;
步骤(3-5):对包括不同浓度或含量的胁迫剂处理的植物种子对应的抗逆值进行比较,以得到植物种子萌发期的抗逆性。
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