[发明专利]一种高侵染力冬虫夏草菌株的培养方法及其应用

权利要求书

1.一种培养冬虫夏草菌株的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)从冬虫夏草虫体分离初始冬虫夏草菌株；

(2)对所述初始冬虫夏草菌株进行变温培养，以便获得培养后的冬虫夏草菌株，其中，所述变温培养在暗培养条件下进行，所述变温培养包括两个阶段，第一阶段的培养温度1～6℃，培养时间1～2天；第二阶段的培养温度16～19℃，培养时间8～12天，所述第二阶段结束之后依次重复所述第一阶段、第二阶段，所述变温培养的总时长为3～5个月。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一阶段的培养时间为1天；

任选地，所述第二阶段的培养时间为10天；

任选地，所述变温培养的总时长为4个月。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进行所述变温培养时所用培养基为PDA固体培养基。

4.一种冬虫夏草菌株，其特征在于，所述冬虫夏草菌株通过权利要求1～3中任一项所述的方法培养获得。

5.一种微生物制剂，其特征在于，所述微生物制剂包括权利要求4所述的冬虫夏草菌株。

6.一种权利要求4所述的冬虫夏草菌株的侵染方法，其特征在于，所述侵染方法包括：

1)培养所述冬虫夏草菌株，以便获取菌体和分生孢子混合培养物；

2)将所述混合培养物配制为菌体悬浮液，并对所述菌体悬浮液进行粉碎处理；

3)利用粉碎处理后的菌体悬浮液向蝙蝠蛾幼虫接种菌体，以便侵染所述蝙蝠蛾幼虫。

7.根据权利要求6所述的侵染方法，其特征在于，所述侵染方法进一步包括：

在步骤3)之前，向粉碎处理后的所述菌体悬浮液中加入促进菌丝生长的物质，以便获取待侵染悬浮液，利用所述待侵染悬浮液向蝙蝠蛾幼虫接种菌体。

8.根据权利要求6或7所述的侵染方法，其特征在于，步骤1)中所述培养条件为：

所述培养在暗培养条件下进行，培养温度16～19℃，培养时间3～5个月，

任选地，所述菌体悬浮液为包括5×10⁵～1×10⁶个/mL菌丝段和分生孢子的混合悬浮液；

任选地，所述粉碎处理的时间为10s～60s；

任选地，所述促进菌丝生长的物质包括蛋白胨和酵母粉；

任选地，所述蛋白胨在所述粉碎处理后的菌体悬浮液中的含量为0.5～2％；

任选地，所述酵母粉在所述粉碎处理后的菌体悬浮液中的含量为0.5～2％；

任选地，所述接种的方式为喷雾接种。

9.一种冬虫夏草，其特征在于，包括：

虫体，

菌丝体，所述菌丝体是由权利要求1～3中任一项所述的方法培养获得的冬虫夏草菌株或权利要求4所述的冬虫夏草菌株形成的，所述菌丝体形成在所述虫体中。

10.一种制备冬虫夏草的方法，其特征在于，所述方法包括：

1-1)采用权利要求6～8中任一项所述的侵染方法侵染蝙蝠蛾幼虫；

1-2)将侵染后的蝙蝠蛾幼虫在温度13～19℃，相对湿度35～55％的条件下培养，以便获得冬虫夏草。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述蝙蝠蛾幼虫虫龄为3～5龄。

12.权利要求1～3中任一项所述的方法培养获得的冬虫夏草菌株或权利要求4所述的冬虫夏草菌株或权利要求5所述的微生物制剂在提高冬虫夏草产量以及规模化生产冬虫夏草中的用途。