[发明专利]一种二维液相色谱纯化植物多糖的方法及装置

权利要求书

1.一种二维液相色谱纯化植物多糖的装置，其特征在于，是一种在线二维液相制备系统，包括：第一切换阀，第二切换阀，第三切换阀，第一色谱柱，第二色谱柱，第一捕集柱，第二捕集柱，第一液泵，第二液泵，第一检测器，第二检测器，分流器，废液池和馏分收集器；

所述第一切换阀，第二切换阀，第三切换阀均分别为两位六通阀；所述第一液泵的出口端通过管路连接第一色谱柱的进口端，所述第一色谱柱的出口端通过管路连接第一检测器的进口端，所述第一检测器的出口端通过管路连接第一切换阀的1号位，所述第一切换阀的2号位通过管路与所述废液池连接，所述第一切换阀的6号位通过管路与所述第二切换阀的1号位连接；

所述第二切换阀的1号位通过管路与所述第一切换阀的6号位连接，2号位通过管路与所述第一捕集柱的进口端连接，6号位通过管路与所述第二捕集柱的进口端连接，3号位通过管路与所述第二切换阀的5号位连接，4号位堵死，5号位通过管路与所述第二色谱柱的进口端连接，所述第二色谱柱的出口端通过管路连接分流器的1号入口位，所述分流器的2号出口位通过管路连接第二检测器的进口端，所述分流器的3号出口位通过管路连接到馏分收集器，馏分收集器与所述废液池连接；

所述第三切换阀的6号位通过管路与所述废液池连接，1号位通过管路与所述第二捕集柱的出口端连接，2号位通过管路与所述第二液泵的出口端连接，3号位堵死，4号位通过管路与所述第三切换阀的2号位连接，5号位通过管路与所述第一捕集柱的出口端连接。

2.如权利要求1所述的装置，其特征是，所述第一色谱柱、第二色谱柱的基质材料分别为硅胶，葡聚糖，琼脂糖或聚甲基丙烯酸甲酯中的任意一种或二种以上。

3.如权利要求1或2所述的装置，其特征是，所述第一色谱柱为体积排阻色谱柱；所述第二色谱柱是氨基色谱柱、C18色谱柱、C8色谱柱、C4色谱柱、HILIC色谱柱中的任意一种。

4.如权利要求1所述的装置，其特征在于，所述第一检测器为示差检测器；所述第二检测器为蒸发光散射检测器。

5.如权利要求1所述的装置，其特征是，所述第一色谱柱、第二色谱柱和捕集柱分别是玻璃柱、不锈钢柱、树脂柱中的任意一种或二种以上，其直径为20-800mm；装填的填料其粒径为50um-200um；运行压力在0.2-20Mpa。

6.如权利要求1所述的装置，其特征是，所述第一色谱柱流动相是纯水溶液，可以添加有机溶剂中的甲醇和/或乙醇，降低流动相极性，提供特殊的选择性，洗脱体积为柱体积的1倍到20倍体积之间；所述第二色谱柱弱洗脱能力的流动相是水，强洗脱能力的流动相是有机试剂中的甲醇、乙醇、乙腈中的任意一种或二种以上，等度洗脱或梯度洗脱，洗脱体积为柱体积的1倍到20倍体积之间。

7.如权利要求1所述的装置，其特征是，所述第一液泵流出的流动相等度洗脱第一色谱柱；所述第二液泵流出的流动相等度洗脱或梯度洗脱第二色谱柱。

8.如权利要求1所述的一种二维液相色谱纯化植物多糖的方法及其装置，其特征是，所述第一色谱柱上样量为装填填料量的千分之一至百分之一。

9.一种二维液相色谱纯化植物多糖的方法，采用权利要求1-8任一所述的装置，其具体步骤包括：

(1)植物多糖提取，获得提取液，预处理脱蛋白脱色；

(2)提取液上样到二维液相色谱蛋白纯化装置的第一色谱柱；

(3)洗脱第一色谱柱，依据检测器切换阀，捕集柱捕集；

(4)洗脱捕集柱，捕集柱中的目标物上样到第二色谱柱；

(5)洗脱第一色谱柱，依据检测器，收集器自动收集目标物；

(6)干燥得到产品。