[发明专利]一株枯草芽孢杆菌BS-15及其制备方法和在诱导植物乳杆菌素EF合成中的应用

说明书

本发明属于微生物技术领域，特别是涉及一株枯草芽孢杆菌BS‑15及其制备方法和在诱导植物乳杆菌素plantaricin EF合成中的应用。本发明提供了一株枯草芽孢杆菌BS‑15，所述枯草芽孢杆菌BS‑15的保藏编号为CGMCC No.20851。本发明提供的枯草芽孢杆菌BS‑15与植物乳杆菌共培养能够有效提高植物乳杆菌分泌的植物乳杆菌素plantaricin EF。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，特别是涉及一株枯草芽孢杆菌 (Bacillussubtilis)BS-15及其制备方法和在诱导植物乳杆菌素 plantaricin EF合成中的应用。

背景技术

乳酸菌细菌素是乳酸菌为适应生长条件或环境变化，由核糖体合成后经过加工修饰的具有抑菌活性的蛋白质或多肽，因其可被人胃肠道蛋白酶降解，且具有无抗药性、安全、无毒、无残留等优良特性，成为益生菌活性代谢产物研究与开发的热点。其中，植物乳杆菌素 plantaricin EF属于Ⅱb类细菌素，由两条肽链组成，其具有耐热性， pH耐受性，广谱抗菌性，能够抑制多种病原菌，如单核增生李斯特菌，蜡样芽胞杆菌，大肠杆菌，枯草芽孢杆菌；能够抑制其他发酵菌株，如酿酒酵母、发酵乳杆菌、植物乳杆菌、肠膜明串珠菌。

由于受到培养条件、细菌生长期及自身调控系统影响，植物乳杆菌素plantaricinEF的产生水平往往很低，严重制约其工业化生产及应用。在纯培养条件下，植物乳杆菌素plantaricin EF的产量低，限制了其大规模应用。

目前可用于提高植物乳杆菌素plantaricin EF产量的方法有优化培养基及发酵条件、高效表达合成相关基因、添加诱导物或施加环境条件刺激等。采用发酵条件优化来提高植物乳杆菌素plantaricin EF 产量的效果有限，而且所使用的大部分培养基成本不够经济；利用基因工程技术构建的植物乳杆菌素plantaricin EF异源表达系统，可能会出现植物乳杆菌素plantaricin EF活性低和安全性有待验证等问题；添加诱导物或施加环境条件刺激可利用诱导调控和胁迫应答提高植物乳杆菌素plantaricin EF产量、不涉及安全性问题且成本低廉，被认为是最有应用前景的技术手段。现有技术对经过共培养得到的植物乳杆菌素plantaricin EF产量仍有一定的局限性。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-15及其制备方法和在诱导植物乳杆菌素plantaricin EF合成中的应用。本发明提供的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-15 能够有效提高植物乳杆菌分泌植物乳杆菌素plantaricin EF。

为了实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

本发明提供了一株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-15，所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-15的保藏编号为CGMCC No.20851。

本发明还提供了上述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-15的培养方法，包括以下步骤：

将上述的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-15接种于培养基中进行培养得到枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-15。

优选的，所述培养基包括胰蛋白胨大豆肉汤培养基；所述接种的接种量为培养基体积的1％～5％；所述培养的温度为30℃～37℃，培养的时间为18～36h。

本发明提供了上述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-15、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-15的菌悬液、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-15的发酵液或枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BS-15的分泌物在促进植物乳杆菌分泌植物乳杆菌素plantaricin EF中的应用。