[发明专利]一种用于检测猫冠状病毒或其相关疾病的核酸组合物及其试剂盒和应用在审
申请号: | 202011620398.0 | 申请日: | 2020-12-31 |
公开(公告)号: | CN112779353A | 公开(公告)日: | 2021-05-11 |
发明(设计)人: | 王佳琳;徐滢;张晓婷 | 申请(专利权)人: | 上海基灵生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12Q1/6858;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 陈秋梦 |
地址: | 201100 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 冠状病毒 相关 疾病 核酸 组合 及其 试剂盒 应用 | ||
1.核酸组合物在制备用于检测猫冠状病毒或其相关疾病的试剂盒中的应用,其特征在于,所述核酸组合物包括:用于检测猫冠状病毒的第一试剂和/或用于检测猫传染性腹膜炎相关突变位点的第二试剂;
所述第一试剂包括引物对1和/或探针1,所述引物对1的序列如SEQ ID No.1~2所示;所述探针1的序列如SEQ ID No.3所示;
所述第二试剂包括引物对2和/或探针2,所述引物对2的序列如SEQ ID No.4~5所示,所述探针2的序列如SEQ ID No.6所示。
2.根据权利要求1所述的核酸组合物在制备用于检测猫冠状病毒或其相关疾病的试剂盒中的应用,其特征在于,所述探针1序列的5’端标记有荧光报告基团,3’端均标记有荧光淬灭基团。
3.根据权利要求2所述的核酸组合物在制备用于检测猫冠状病毒或其相关疾病的试剂盒中的应用,其特征在于,所述荧光报告基团选自FAM、VIC、HEX、CY3、NED、TXR、ROX、CY5中的任意一种,所述荧光淬灭基团选自TAMRA、BHQ1、BHQ2、BHQ3和QSY中的任意一种。
4.根据权利要求1所述的核酸组合物在制备用于检测猫冠状病毒或其相关疾病的试剂盒中的应用,其特征在于,所述探针2为Taqman-MGB探针,5’端标记有荧光报告基团。
5.根据权利要求4所述的核酸组合物在制备用于检测猫冠状病毒或其相关疾病的试剂盒中的应用,其特征在于,所述荧光报告基团选自FAM、VIC、HEX、NED、TXR和ROX中的任意一种。
6.一种核酸组合物,其特征在于,所述核酸组合物包括:用于检测猫冠状病毒的第一试剂和/或用于检测猫传染性腹膜炎的第二试剂;
所述第一试剂包括引物对1和/或探针1,所述引物对1的序列如SEQ ID No.1~2所示;所述探针1的序列如SEQ ID No.3所示;
所述第二试剂包括引物对2和/或探针2,所述引物对2的序列如SEQ ID No.4~5所示;所述探针2的序列如SEQ ID No.6所示。
7.一种试剂盒,其特征在于,其包括如权利要求6所述的核酸组合物。
8.根据权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,当所述核酸组合物包括引物对1、引物对2、探针1和探针2时,所述引物对1和所述引物对2中上下游引物,以及所述探针1~2的工作浓度均为0.2~0.6μM。
9.一种用于检测猫冠状病毒的方法,其特征在于,其包括:采用如权利要求6所述的核酸组合物,或如权利要求7或8所述的试剂盒对待测样本进行检测;
所述方法不以疾病的诊断或治疗为直接目的。
10.根据权利要求9所述的用于检测猫冠状病毒的方法,其特征在于,所述检测的方式为PCR检测,所述PCR检测的反应条件为:48~52℃逆转录5~30min;93~97℃预变性2~5min;93~97℃变性5~15s;56~60℃退火延伸20~40s。
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