[发明专利]一种同时扩增人13个STR基因座的引物组、试剂盒及其应用

说明书

本发明提供了一种同时扩增人13个STR基因座的引物组、试剂盒及其应用，属于分子遗传学技术领域。本发明中，所述13个STR基因座包括12个常染色体STR基因座和1个性别鉴定STR基因座；本发明能够实现在一个反应中同时扩增13个片段小于320bp的STR基因座，包含了公安部规定的8个核心基因座以及5个优选基因座，同时还包含了1个性别鉴定基因座，可有效的预防微量、降解检材大片段基因座检测丢失问题。13个STR基因座与市面主流试剂盒联合起来，对微量、降解DNA可以得到更多基因座信息，从而有效提高个体识别力。

技术领域

本发明涉及分子遗传学技术领域，尤其涉及一种同时扩增人13个STR基因座的引物组、试剂盒及其应用。

背景技术

STR(short tandem repeats，短串连重复序列)又称微卫星序列，是大量存在于人类基因组DNA中的短串连重复序列，重复单位为2～6个核苷酸。由于具有高度多态性和稳定性，并且与AMP-FLP和VNTR等分型方法相比，STR基因分型方法所扩增的产物长度小得多(小于500bp)，因此对于模板质量要求较低，即使降解的DNA模板也可以进行分析。此外，STR分型适用于多种DNA纯化方法所纯化的DNA，而这些纯化方法所获得的DNA量往往不够作Southern印迹分析。鉴于以上这些特点，STR分型技术已经广泛应用于法医身份识别鉴定。

法医DNA数据库是集成现代DNA检验技术、信息技术、网络技术和科学管理等要素，实现跨时空多元化应用、精确打击犯罪、保护人民、维护社会稳定的十分重要的科技利器。法医DNA数据库的核心在于所收录的STR(short tandem repeat)数据信息，一个完善的法医DNA数据库应该包含常染色体STR数据库和Y染色体STR数据库。Y染色体STR数据为案件提供侦查线索，缩小侦查范围，可以预测罪犯可能存在的地区、种族甚至姓氏，常染色体STR数据用于最后罪犯个体的筛查及确认。

目前公布的20个常染色体STR核心基因座(20个基因座，包含Amelogenin、CSF1PO、D3S1358、D5S818、D7S820、D8S1179、D13S317、D16S539、D18S51、D21S11、FGA、TH01、TPOX、vWA、D2S1338、D19S433、D6S1043、D12S391、Penta D、Penta E)及10个常染色体STR优选基因座(10个基因座，包含D1S1656、D2S441、D22S1045、D10S1248、D8S1132、D15S659、D3S3045、D19S253、D6S477、D10S1435用于扩大筛查使用)，相对应的，DNA法医鉴定对试剂盒的基因座数量、特异性及试剂盒的灵敏度就有了更高的需求。但是在复杂多变的自然环境中，尤其是潮湿、高温、紫外线、暴晒、微生物、强酸等环境因素会使生物检材中的DNA损伤，双链断裂，DNA分子长度变短。对这种降解的生物检材进行常规STR分型检验，就容易出现大片段STR基因座位点等位基因缺失，导致分型失败。极大的限制了STR分型技术在微量、降解生物检材中的运用，从而导致一些重要的生物检材在案件的侦破中的价值未能得到充分的体现，不利于案件的快速侦破。

为了从根本上解决公安用户的使用需求，提高试剂盒的兼容性、减少扩增时间、提高试剂盒的检材适应性、提高试剂盒的灵敏度，弥补常规STR检测技术的运用缺陷，在原来的STR分型技术基础上，通过重新设计引物，使正反向引物尽可能移向核心重复序列，减小扩增产物片段的长度，同时保持原STR基因座位点的遗传多态性和原有的分型结果不变。

发明内容

本发明的目的在于提供一种同时扩增人13个STR基因座的引物组、试剂盒及其应用，本发明的引物组和试剂盒扩增的基因座片段小、特异性强、灵敏度高。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：