[发明专利]一种肥皂荚组织培养再生体系建立的方法

权利要求书

1.一种肥皂荚组织培养再生体系建立的方法，包括外植体消毒、无菌苗培养、诱导培养、生根培养；其特征在于，在对外植体消毒前进行预处理；所述的诱导培养，是采用愈伤组织诱导培养基同时诱导愈伤组织和不定芽，再将不定芽接种在不定芽增殖培养基上进行增殖培养；

所述的预处理，是将肥皂荚种子先以处理液浸泡2-5min，同时辅以频率为30-40W的微波辐射处理；

所述的处理液，按质量百分数计，其组成为：3-7％的高锰酸钾、10-15％的浓度为7％的稀硫酸溶液、78-87％的水；

所述的愈伤组织诱导培养基，其组成为：MS+6-BA 1.0～3.0mg/L+TDZ 0.01～0.05mg/L+NAA 0.1～0.5mg/L+0.6-1.2％的琼脂+2-5％的蔗糖；

所述的不定芽增殖培养基，其组成为：MS+6-BA 0.1～1.0mg/L+NAA 0.01～0.1mg/L+0.6-1.2％的琼脂+2-5％的蔗糖；

所述的生根诱导培养基，其组成为：1/2MS+IBA 0.1～0.5mg/L+NAA 0.1～0.5mg/L+0.6-1.2％的琼脂+2-5％的蔗糖。

2.如权利要求1所述的一种肥皂荚组织培养再生体系建立的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.将采集的肥皂荚种子冲洗干净后在超净工作台中消毒处理，接种在MS培养基上培养无菌苗，得到无菌苗子叶；

b.将步骤a中得到的无菌苗子叶接种在愈伤组织诱导培养基上，同步诱导愈伤组织和不定芽；

c.将不定芽接种在不定芽增殖培养基上进行增殖培养，得到增殖苗；

d.将增殖苗接种在生根诱导培养基上进行生根培养。

3.如权利要求2所述的一种肥皂荚组织培养再生体系建立的方法，其特征在于，所述的消毒处理，是先用75％的酒精浸泡处理50-70s，再用0.1％的升汞浸泡处理17-22min，用无菌水清洗3-5次，吸干水分即可。

4.如权利要求1所述的一种肥皂荚组织培养再生体系建立的方法，其特征在于，所述培养基的pH值在5.5-6.0范围内；培养过程中温度25±1℃，湿度70-80％，光照强度2000-2200lx，每天光照时间12h。