[发明专利]一种临床研究血浆样品中喹硫平浓度的分析方法

说明书

本发明涉及一种临床研究血浆样品中喹硫平浓度的分析方法，包括以下步骤：步骤1：血浆样品前处理；步骤2：色谱分离；步骤3：质谱检测。本发明的分析方法具有操作简单、通量高、灵敏度高、精密和准确。

技术领域

本发明涉及一种临床研究血浆样品中喹硫平浓度的分析方法。

背景技术

富马酸喹硫平缓释片是一种非典型抗精神病药物，对多种神经递质受体有相互作用。由阿斯利康制药有限公司开发，2007获FDA获批上市，成为FDA批准的治疗精神分裂症类药物。为了支持喹硫平的临床研究以及仿制药的研发，需要一种检测人血浆样品中喹硫平浓度的方法。目前用于检测喹硫平在生物基质中的浓度的相关技术披露较少。液相色谱-串联质谱联用法(LC-MS/MS)由于其优异的选择性、灵敏度、通量及适用性被广泛的用于生物基质中药物浓度测定。本发明基于LC-MS/MS技术，开发了检测临床研究血浆样本中喹硫平的浓度方法。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的是提供一种临床研究血浆样品中喹硫平浓度的分析方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种临床研究血浆样品中喹硫平浓度的分析方法包括以下步骤：

步骤1：血浆样品前处理，向96孔板中加入血浆样品，内标溶液和乙腈，涡流振荡，离心，取出上清转移至96孔板中，进行LC-MS/MS分析；

步骤2：色谱分离；

色谱条件，色谱柱：XDB-C18柱，1.8μm，50×4.6mm；进样量：1μL；柱温：40℃；流动相A相选用10mM醋酸铵水溶液含0.1％甲酸，流动相B项为乙腈含0.1％甲酸，采用体积比为40：60的A：B相等度洗脱；自动进样器温度为4℃，流动相的流速为：0.5mL/min；

步骤3：质谱检测；

质谱条件：电喷雾电离源；电压为5500V；离子源温度为500℃；Curtain Gas和CID压力分别为35和9psi；扫描模式为+MRM；监测离子反应分别为：喹硫平，m/z 384.1→m/z279.2；喹硫平-d8，m/z 392.2→m/z 286.1；CE为38eV；DP为80V；扫描时间为250ms。

优选地，步骤1血浆样品前处理，取50.0μL血浆样品，分别加入50.0μL内标工作液、500μL甲醇，涡流10min，以4500rpm转速离心10min，取出上清200μL转移至96孔板中，取1.00μL进行LC-MS/MS分析。

借由上述方案，本发明至少具有以下优点：

1、本发明采用简单的蛋白沉淀法处理血浆样品，且没有复杂的浓缩过程，前处理通量较高。

2、本发明检测方法灵敏度较高，浓度为2.00ng/mL定量下限样品信噪比约为69、检测限经计算约为0.100ng/mL，且色谱进样量仅为1.00μL。

3、本发明针对检测喹硫平血浆浓度仪器分析速度快，色谱运行时间仅为2min。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1是本发明喹硫平的产物离子全扫描质谱图；

图2是本发明的内标喹硫平-d8的产物离子全扫描质谱图；

图3是本发明的喹硫平(左)和喹硫平-d8(右)在人血浆中空白人血浆样品的MRM色谱图；