[发明专利]葡萄糖酸钙有关物质的高效液相色谱分析方法

权利要求书

1.一种葡萄糖酸钙有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于：对于含有葡萄糖酸钙有关物质混合物用高效色谱法进行成分分析的方法；

其中，所述的葡萄糖酸钙有关物质包括：麦芽三糖酸钙、异麦芽糖酸钙、麦芽糖酸钙或葡萄糖二酸钙中的一种或多种；

所述的方法，包括以下步骤：

1）对照品溶液制备：

混合对照品溶液：分别精密称取麦芽三糖酸钙、异麦芽糖酸钙、葡萄糖二酸钙对照品适量，加水溶解并稀释成每1mL中含麦芽三糖酸钙、异麦芽糖酸钙、葡萄糖二酸钙各2.5μg的溶液，作为混合对照品溶液；

麦芽糖酸钙对照品溶液：分别精密称取麦芽糖酸钙对照品适量，加水溶解并稀释成每1mL中含2.5μg的麦芽糖酸钙对照品溶液；

2）供试品溶液制备：

精密称取葡萄糖酸钙样品适量，用水溶解并稀释成每1mL中含有5mg的葡萄糖酸钙溶液；

3）加标供试品溶液制备：

混合加标供试品溶液：精密称取葡萄糖酸钙样品、麦芽三糖酸钙、异麦芽糖酸钙及葡萄糖二酸钙对照品各适量，用水溶解并稀释成每1mL中含葡萄糖酸钙5mg、麦芽三糖酸钙、异麦芽糖酸钙、麦芽糖酸钙、葡萄糖二酸钙各2.5μg的溶液，作为混合加标供试品溶液；

麦芽糖酸钙加标供试品溶液：精密称取葡萄糖酸钙样品及麦芽糖酸钙对照品各适量，用水溶解并稀释成每1mL中含葡萄糖酸钙5mg、麦芽糖酸钙2.5μg的溶液，作为麦芽糖酸钙加标供试品溶液；

4）色谱条件：

采用高效液相色谱仪进行检测

检测器：示差折光检测器；

色谱柱：氢离子色谱柱，Rezex ROA-Organic Acid H+ (8%) Phenomenex 00H-0138-K0；规格为300*7.8mm；

柱温：25-35℃；

流动相：0.45%-0.55%甲酸溶液；

流速：0.28-0.32mL/min；

进样体积：10-100μL；

运行时间：60min；

5）测定方法：

分别精密量取所述对照品溶液、供试品溶液及加标供试品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图；并且所述方法在同一个高效液相色谱条件下分离葡萄糖酸钙及其有关物质；

供试品溶液色谱图中，确定所得供试品溶液中如有与已知杂质保留时间一致的色谱峰，按外标法进行计算，不得过0.05%；其中，已知杂质为葡萄糖酸钙、麦芽三糖酸钙、异麦芽糖酸钙、麦芽糖酸钙及葡萄糖二酸钙，

含量%=

式中：A_x：供试品溶液中有关物质的峰面积；

A_R：对照品溶液中有关物质的峰面积；

C_R：对照品溶液对应的浓度，mg/mL；

C_x：供试品溶液浓度，mg/mL。

2.根据权利要求1所述的葡萄糖酸钙有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于：所述的柱温为30℃。

3.根据权利要求1所述的葡萄糖酸钙有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于：所述的流动相为0.5%甲酸溶液。

4.根据权利要求1所述的葡萄糖酸钙有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于：所述的流速为0.3mL/min。

5.根据权利要求1所述的葡萄糖酸钙有关物质的高效液相色谱分析方法，其特征在于：所述的进样体积50μL。