[发明专利]一种测定CBZ-AEEA含量的方法

说明书

本发明一种测定CBZ‑AEEA含量的方法，高效液相色谱条件为：色谱柱为Agilent ZORBAX SB‑C18，检测波长为210nm，柱温为35℃，流动相A为0.1%磷酸，流动相B为乙腈，流动相流速为1ml/min；洗脱程序：0‑5min内，流动相A由95%将至70%，流动相B由5%升至30%，5‑15min内，流动相A由70%将至50%，流动相B由30%升至50%，15‑25min内，流动相A由50%将至30%，流动相B由50%升至70%，25‑28min内，流动相A由30%将至0，流动相B由70%升至100%，28‑40min内，流动相A保持0，流动相B保持100%，40‑41min内，流动相A由0升至95，流动相B由100%降至5%，41‑45min内，流动相A保持95%，流动相B保持5%。本发明可有效将CBZ‑AEEA与CBZ‑2A、CBZ‑3A、CBZ‑4A、CBZ‑6A、CBZ‑8A，以及CBZ‑β‑Ala分离，从而实现准确检测待测样品中CBZ‑AEEA的含量。

技术领域

本发明属于化学分析领域，具体涉及一种测定CBZ-AEEA含量的方法。

背景技术

CBZ-AEEA生产过程中，不免产生各种杂质，其中以同系列的CBZ-2A、CBZ-3A、CBZ-4A、CBZ-6A、CBZ-8A，以及CBZ-β-Ala为主，且由于CBZ-AEEA与CBZ-β-Ala性质相近，不易分离。现有技术中，并无一种检测方法可以有效将CBZ-AEEA与上述杂质分离，以测定CBZ-AEEA的含量。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种测定CBZ-AEEA含量的方法，该方法基于高效液相色谱仪，可有效将CBZ-AEEA与CBZ-β-Ala分离，以及与其同系列杂质分离，从而准确测定CBZ-AEEA的含量。

一种测定CBZ-AEEA含量的方法，高效液相色谱条件为：色谱柱为Agilent ZORBAXSB-C18，检测波长为210nm，柱温为35℃，流动相A为0.1%磷酸，流动相B为乙腈，流动相流速为1ml/min；洗脱程序：0-5min内，流动相A由95%将至70%，流动相B由5%升至30%，5-15min内，流动相A由70%将至50%，流动相B由30%升至50%，15-25min内，流动相A由50%将至30%，流动相B由50%升至70%，25-28min内，流动相A由30%将至0，流动相B由70%升至100%，28-40min内，流动相A保持0，流动相B保持100%，40-41min内，流动相A由0升至95，流动相B由100%降至5%，41-45min内，流动相A保持95%，流动相B保持5%。

进一步的，进样量为3μL。

进一步的，待测样品浓度为5mg/mL。

进一步的，待测样品的稀释剂为乙腈。

进一步的，所述色谱柱规格为250×4.6mm,5μm。

进一步的，所述方法，具体包括以下步骤：

（1）设置高效液相色谱条件；

（2）绘制标准曲线：将CBZ-AEEA标准品配置成不同浓度的试样，不同浓度的标准品试样进入高效液相色谱仪进行检测，得到不同浓度的主产品CBZ-AEEA的峰对应的峰面积，绘制出标准曲线，得到回归方程；

（3）检测待测样品：将待测样品稀释至5mg/mL，将待测样品进入高效液相色谱仪中进样检测，记录待测样品中CBZ-AEEA峰的峰面积，并将其带入步骤（2）所得回归方程中，计算出CBZ-AEEA的浓度，再根据计算浓度与实际稀释浓度计算出含量。

与现有技术相比，本发明的有益效果在于：