[发明专利]用于检测阻断分析物的测定

说明书

本发明的题目是用于检测阻断分析物的测定。本公开提供了用于检测阻断分子结合对的第一分子组分和第二分子组分结合的分析物(例如，中和抗体)的测定(如侧流测定)及其组分。在一些实施方式中，所公开的测定及其组分能够快速检测来自个体样品中的SARS‑CoV‑2中和抗体。在本公开的其它方面中还提供了本文描述的测定的装置、制造和使用测定的方法、和测定的套组。

技术领域

本公开涉及用于检测阻断分子结合对的第一分子组分和第二分子组分结合的分析物(如中和抗体)的测定。在本公开的其它方面中还提供了本文描述的测定的装置、制造和使用测定的方法、和测定的套组(试剂盒，kits)。

背景技术

床旁(即时，Point-of-care)测定通常被设计以基于分析物的结构特征来检测分析物。这种测定的实例是侧流免疫测定。侧流免疫测定横跨多个行业领域(sectors)被广泛用作床旁检测，这些领域包括医疗诊断、疾病诊断、环境测试、动物健康测试、以及食品和饲料测试。大多数侧流测定采用三明治形式或竞争形式(Dzantiev等人,TrAC Trends inAnalytical Chemistry,55,2014；Sajid等人,Journal of Saudi Chemical Society,19,2015)。在示例性三明治形式中，对目标分析物特异的一次抗体被固定在测试线上，并且对目标分析物特异的标记抗体被加载到测试线上游的测试条的区段中。当含有分析物的样品被施加到测试条时，分析物被标记抗体捕获并朝向测试线流动。然后，测试线处的固定化抗体捕获与标记抗体复合的分析物，从而与分析物形成可检测的三明治状物。测试条还可以包含带有固定化的二次抗体的对照线，其中经过测试线的标记抗体被捕获在对照线处，以确保测试条的正确操作。测试线处的颜色强度与目标分析物的量相对应，并且可通过光带读出器或视觉检查进行测量。竞争形式通常用于检测低分子量化合物，这些化合物太小而不能同时与两种抗体结合，具有两种一般布置(layouts)。在第一布置中，测试条具有包含固定化的分析物(与被检测的相同)的测试线、包含固定化的二次抗体的对照线、和对测试线上游的测试条中所加载的分析物特异的移动标记抗体。当将含有分析物的样品施加到测试条时，移动的标记抗体与分析物形成复合物。当复合物沿测试条向下行进(travel)时，分析物不在测试线处结合，而是被固定化的二次抗体结合在对照线处。当分析物不存在时，移动的标记抗体在测试线处与固定化的分析物结合。在第二布置中，测试条具有包含对分析物特异的固定化抗体的测试线，以及加载在测试线上游的测试条中的移动的标记分析物(与被检测的相同)。当将含有分析物的样品施加到测试条时，移动的标记分析物和分析物竞争与测试线中的固定化抗体的结合，因此较少的移动的标记分析物结合在测试线处。Li等人,Analytical Chemistry,83,2011。这些已知的测定是使用对感兴趣的分析物特异的结合试剂(例如，固定化抗体)来设计的。

本文引用的所有参考文献，包括专利申请和出版物，均通过引用以其整体并入。

发明内容

在一些方面中，本文提供了用于检测阻断分子结合对的第一分子组分和第二分子组分结合的分析物的测试条，所述测试条包括：(a)色谱条，具有第一末端区域(即，近侧区域)和第二末端区域(即，远侧区域)，其中色谱条包括第一测试区，其中第一分子组分被固定在第一测试区内；和(b)样品结合区，包括具有第一末端区域和第二末端区域的结合垫，其中结合垫包括用检测剂标记的第二分子组分，其中色谱条的第一末端区域与结合垫的第二末端区域毛细管连通。

在一些实施方式中，色谱条还包括对照区，并且其中对照捕获剂被固定在对照区内。

在一些实施方式中，测试条还包括含有样品垫的样品添加区，其中样品垫与结合垫的第一末端区域毛细管连通。

在一些实施方式中，测试条还包括含有芯吸垫(wicking pad)的吸收区，其中色谱条的第二末端区域与芯吸垫毛细管连通。

在一些实施方式中，分子结合对包括：(i)病毒表面多肽或其片段(如刺突蛋白或其片段，例如，包括受体结合结构域(RBD)多肽或其一部分和/或N-端结构域(NTD)多肽或其一部分的多肽)；和(ii)细胞表面多肽或其片段。

在一些实施方式中，分子结合对不包括抗体或其片段。