[发明专利]一种植物加工产品中转基因成分的检验方法

权利要求书

1.一种植物加工产品中转基因成分的检验方法，其特征在于：包括以下步骤，

(1)提取样品DNA，采用实时荧光PCR技术对样品DNA筛选基因或品系特异性片段扩增；

(2)根据实时荧光扩增曲线，判断该样品中是否含有转基因成分；

(3)对外源基因检测阳性的样品，或已知为转基因阳性的样品，根据PCR扩增结果，判定该样品中含有转基因品系成分。

2.根据权利要求1所述的一种植物加工产品中转基因成分的检验方法，其特征在于：所述步骤(1)中，采用具有相同效果的植物基因组DNA提取试剂盒进行DNA提取。

3.根据权利要求1所述的一种植物加工产品中转基因成分的检验方法，其特征在于：步骤(1)中，样品DNA用紫外分光光度计测定260nm和280nm处吸收值，分别计算核酸的纯度和浓度，计算公式如下，

DNA浓度(mg/mL)＝50×OD2so。

4.根据权利要求1所述的一种植物加工产品中转基因成分的检验方法，其特征在于：所述步骤(2)，判断该样品中是否含有转基因成分，采用每个样品应有2个平行实验，同时每次检测必须设立3个对照；

(1)阳性对照，为对应的转基因植物样品品系或含有相应外源基因的转基因植物样品基因组DNA，或含有上述片段的质粒标准分子DNA；

(2)阴性对照，非转基因植物样品DNA；

(3)空白对照，设两个，一是提取DNA时设置的提取空白对照，二是PCR反应的空白对照。

5.根据权利要求1所述的一种植物加工产品中转基因成分的检验方法，其特征在于：所述步骤(2)中，对实时荧光PCR预混液进行配制，DNA聚合酶(5U/μL)、PCR反应缓冲液、氯化镜、dNTPs和UNG酶按比例配制的溶液。

6.根据权利要求1所述的一种植物加工产品中转基因成分的检验方法，其特征在于：所述步骤(2)中，测试样品检测Ct值大于或等于40，内源基因检测Ct值小于或等于30，则可判断该样品不含所检基因或品系；测试样品检测Ct值小于或等于36，内源基因检测Ct值小于或等于30，则可判断该样品含所检基因或品系；测试样品检测Ct值在36-40之间，调整模板浓度重做实时荧光PCR。

7.根据权利要求1所述的一种植物加工产品中转基因成分的检验方法，其特征在于：所述步骤(1)中，实时荧光PCR为实时荧光聚合酶链式反应，是指在聚合酶链式反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，荧光信号的强弱直接反映模板数量。

8.根据权利要求5所述的一种植物加工产品中转基因成分的检验方法，其特征在于：所述Ct值为每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。