[发明专利]一种纯化维拉卡肽的方法有效
申请号: | 202011641379.6 | 申请日: | 2020-12-31 |
公开(公告)号: | CN112552376B | 公开(公告)日: | 2022-11-25 |
发明(设计)人: | 谷海涛;蒋昌威 | 申请(专利权)人: | 江苏诺泰澳赛诺生物制药股份有限公司 |
主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C07K1/20 |
代理公司: | 连云港润知专利代理事务所 32255 | 代理人: | 刘喜莲 |
地址: | 222000 江苏省连云*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 纯化 维拉卡肽 方法 | ||
1.一种纯化维拉卡肽的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将固相合成的维拉卡肽粗样溶于水中,得粗液;
(2)取粗肽溶液加入等体积的乙腈溶液,样品在溶液中析出,再加入等体积的饱和氯化钠溶液促进样品析出,过滤得固体;
(3)将滤出的固体用水溶解,过滤,用C18反相色谱柱,以0.2%盐酸为A相,乙腈为B相,梯度为20%-30%,检测波长为220nm进行HPLC线性洗脱,得到纯度大于99.00%,单杂小于0.1%的样品;
步骤(3)中的洗脱梯度为:
(4)所得样品,用C18反相色谱柱,以50mmol/L氯化铵溶液为A1相,乙腈为B相,梯度为5%-5%,完成离子交换,再以0.1%盐酸水溶液进为A2相,乙腈为B相,先以5%-5%的梯度平衡,后再以50%-50%的梯度洗脱得到转盐样品;
步骤(4)中的洗脱梯度为:
(5)将转盐后的样品进行减压浓缩,冷冻,极限真空干燥,得到维拉卡肽终产品。
2.根据权利要求1所述的一种纯化维拉卡肽的方法,其特征在于,步骤(1)中,维拉卡肽粗样溶于水中至溶解浓度50g/L。
3.根据权利要求1所述的一种纯化维拉卡肽的方法,其特征在于,步骤(5)中,将转盐样品在35±2℃下减压浓缩,浓度为30g/L,用0.22um有机系滤膜过滤,分装至冻干盘中,高度1.0-1.2cm,进行冷冻干燥。
4.根据权利要求1或2所述的一种纯化维拉卡肽的方法,其特征在于,步骤(5)中,所述的冻干操作步骤如下:
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