[发明专利]血浆神经酰胺作为预测肝切除术后肝功能不全的生物标志物及其应用

说明书

本发明属于生物医药技术领域，涉及用于肝切除术后肝功能不全预后预测的生物标志物，本发明公开了血浆神经酰胺作为预测肝切除术后肝功能不全的生物标志物及其应用，本发明采用HPLC‑MS/MS法检测神经酰胺在人血浆中的浓度，通过临床试验证明了18：1碳‑神经酰胺(C18：1‑Cer)和/或20：1碳‑神经酰胺(C20：1‑Cer)在发生肝切除术后肝功能不全组的术前血浆样本中的含量明显高于其在未发生肝切除术后肝功能不全组的含量。利用本发明进行肝切除术后肝功能不全的辅助诊断和预后判断，对围手术期临床治疗具有指导意义。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及血浆神经酰胺作为预测肝切除术后肝功能不全的生物标志物及其应用。

背景技术

肝切除术是治疗肝脏各种良恶性病变的重要手段，虽然得益于现代外科手术以及围手术期管理技术的提高，肝切除术后患者的预后已有显著改善，但是肝切除术后肝功能不全(post-hepatectomy liver failure，PHLF)仍是引起肝切除术后患者死亡的重要并发症，尤其是在接受半肝切除的大范围肝切除术的患者。根据2011年国际肝脏外科学组(International Study Group of Liver Surgery，ISGLS)提出了PHLF诊断及分级标准，PHLF的发病率可能在0.7％到34％之间，并将PHLF分为A、B、C三级，并且是延长住院时间、增加费用和不良长期结果的主要原因。同时C级PHLF病人的术后死亡率高达47.6％。然而，由于对PHLF发生发展的病理生理机制缺乏理解，往往导致PHLF的临床防治陷入困境，临床上仍然缺乏防治PHLF的有效措施，因此对PHLF展开深入的研究具有重要的临床意义。

鞘脂代谢物包括神经酰胺(ceramides，CER)、鞘氨醇(sphingosine，SPH)、和鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate，S1P)等是一类调节细胞增殖的重要活性脂质。既往认为CER、SPH抑制细胞增殖，而S1P促进细胞增殖，CER、SPH和S1P的平衡是影响细胞增殖的关键因素。CER是由神经鞘氨醇长链碱基与不同的脂肪酸碳链构成，CER的种类繁多，根据脂肪酸碳链的饱和度，它可分为饱和CER、不饱和CER两大类，再根据脂肪酸碳链的长度，CER可分为短链(少于6个碳原子)、中链(6-12个碳原子)、长链(14-20个碳原子)及超长链(多于22个碳原子)四类。CER的生成途径包括从头合成、复合鞘脂降解途径以及补救合成途径。CER降解生成SPH，SPH可被磷酸化生成S1P。随着CER定性定量技术的发展、成熟，研究不同种类的CER及其代谢途径的特异性生物学功能已渐渐成为脂质学领域的研究热点。CER、SPH和S1P对各种肝病的病理生理机制有重要调节作用。越来越多的临床研究证实，CER及其代谢物的水平与多种肝病显著相关，CER及其代谢物水平是潜在的诊断性标志物，同时，CER代谢途径也是治疗这些肝病的潜在靶点。

研究不同种类的CER的特异性生物学功能是脂质学领域的研究热点，越来越多的研究也证实，不同种类的CER及其代谢物的水平与不同肝病的发生发展有一定相关性。运用HPLC-MS/MS开展对不同种类CER的定性定量实验。

目前，关于神经酰胺代谢在肝切除术后肝功能不全的作用机制尚不清楚，其功能和表达变化的临床意义尚未有报道。因此，运用HPLC-MS/MS的技术，对进行肝切除病人的术前血浆进行神经酰胺靶向定量定性分析，收集围术期相关临床数据，研究CER水平与PHLF的相关性，确立神经酰胺水平对PHLF的临床诊疗意义，探索针对神经酰胺水平对肝切除术后肝功能不全的相关性至关重要。

发明内容

为解决上述问题，本发明第一个方面是提供用于肝切除术后肝功能不全预后预测的生物标志物，所述生物标志物为18：1碳-神经酰胺(C18：1-Cer)和/或20：1碳-神经酰胺(C20：1-Cer)。

在本发明的技术方案中，所述神经酰胺还可以为18：1碳-神经酰胺(C18：1-Cer)和/或20：1碳-神经酰胺(C20：1-Cer)的同源物、或具有其生物活性的变体形式。