[发明专利]一种乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、对羧基化的琼脂糖凝胶微球进行清洗，得到琼脂糖凝胶微球悬浮液；

S2、将氨基修饰的核酸适配子置于适配子溶解缓冲液中，振荡溶解后进行水浴处理，再置于室温环境中，待其复性后即得到溶解的适配子；

S3、将N-羟基丁二酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐按照预设的摩尔比混合后溶于2-(N-吗啉)乙磺酸缓冲溶液中，得到交联催化剂；

S4、将步骤S3得到的所述交联催化剂加入步骤S1得到的所述琼脂糖凝胶悬浮液中，充分混匀后再加入步骤S2得到的所述溶解的适配子，进行酰胺反应；

S5、待步骤S4中所述酰胺反应完成后，加入三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液终止反应，经漂洗后得到乙型肝炎病毒吸附剂。

2.根据权利要求1所述的一种乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于：在步骤S2中，所述水浴处理的温度为20～80℃，时间为5～30min。

3.根据权利要求1所述的一种乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于：在步骤S3中，所述预设的摩尔比为1:(1～4)。

4.根据权利要求1所述的一种乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于：在步骤S4中，所述酰胺反应的反应温度为25～30℃，反应时间为4～20h。

5.根据权利要求1或2所述的一种乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于：在步骤S2中，所述适配子溶解缓冲液中含有Na₂HPO₄和MgCl₂，所述的Na₂HPO₄和MgCl₂浓度分别为150～250mmol/L和3～7mmol/L；所述适配子溶解缓冲液的pH为7.5～8.5。

6.根据权利要求1所述的一种乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于：在步骤S3中，所述2-(N-吗啉)乙磺酸缓冲溶液的浓度为0.04～0.06mol/L，pH值为5.0～6.0。

7.根据权利要求1所述的一种乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于：在步骤S5中，所述三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液的pH值为8.5～9.5；所述漂洗过程使用0.01mol/L的磷酸缓冲盐溶液进行漂洗。

8.根据权利要求1或5所述的一种乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，其特征在于：在步骤S2中，所述适配子的序列为5′-TGAGC CTCTG GATAC TTTTT ACCCA CAGCG AACAG CGGCGGACAT AATAG TGCTT ACTAC GACGC-3′。

9.一种乙型肝炎病毒吸附剂，其特征在于：所述乙型肝炎病毒吸附剂根据权利要求1～8中任一权利要求所述的制备方法制备得到，包括羧基化的琼脂糖微球以及与所述羧基化的琼脂糖微球偶联的适配子。

10.一种权利要求1～8中任一权利要求所述的制备方法制得的乙型肝炎病毒吸附剂或权利要求9所述的乙型肝炎病毒吸附剂的应用，其特征在于：所述乙型肝炎病毒吸附剂用于血液吸附领域。