[发明专利]基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法与应用

说明书

本发明提供了一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法与应用。通过合成具有特定结构的DNA纳米材料，并将其与适配子连接，得到连接有适配子的DNA纳米材料；再将连接有适配子的DNA纳米材料负载于特定的吸附载体上，得到基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂。通过上述方式，本发明能够将DNA纳米材料作为连接适配子和吸附载体的中间结构，不仅能够避免将适配子与吸附载体直接偶联时需要进行的复杂操作，简化制备工艺；还能够在稳定连接适配子和吸附载体的同时，有效提高吸附剂的吸附效率，从而实现对乙型肝炎表面抗原的高效吸附，大幅降低血液中乙型肝炎表面抗原的含量，具有较高的实际应用价值。

技术领域

本发明涉及生物医学吸附材料技术领域，尤其涉及一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法与应用。

背景技术

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)感染而引发的肝脏类疾病，包括急性和慢性肝炎。HBV表面抗原(HBsAg)血清检测阳性是确诊的主要标准，在临床实践中，清除HBsAg被认为是慢性乙型肝炎最关键的治疗终点，与改善临床结局、延长生存期、降低肝硬化和肝细胞癌的发生率相关。目前，针对乙型肝炎的治疗方法主要集中在药物筛选、给药和靶向治疗等方面，但这些治疗方案效果有限，且长期治疗效果不佳。

基于现有治疗方案存在的问题，体外血液净化系统逐渐受到研究者的关注，并被应用于乙型肝炎的治疗。体外血液净化系统包括血液滤过、血液灌流和血液吸附，其工作原理主要是通过降低血液中病原体相关分子的浓度来降低毒性的严重程度和中毒时间，其中，血液吸附与其他净化方式的主要区别在于其在非特异性吸附材料的基础上引入了能够与目标分子特异性结合的配体，制成相应的吸附剂，从而实现对特定目标分子的有效去除。由于吸附剂的吸附效果与其作为载体的吸附材料、配体的种类及其结合方式等密切相关，如何选择适宜的载体、配体及其结合方式已成为乙型肝炎病毒吸附剂开发过程的研究重点。

公开号为CN111659355A的专利提供了一种烷基化修饰的乙肝病毒免疫吸附剂及其制备方法，该专利通将活化的吸附载体与乙肝病毒抗体偶联结合，并对乙肝病毒抗体中的巯基进行烷基化修饰，经还原处理后即可得到吸附效率高、特异性好和可再生性好的烷基化修饰的乙肝病毒免疫吸附剂，增加了临床使用中的可操作性和重复利用率，进而降低了生产和使用成本。然而，该专利中是以抗体作为配体，而抗体的生产需要很高的成本和较长的时间，抗体在室温或更高的温度下经过一定时间会发生不可逆的变性，且抗体具有较高的免疫原性。此外，该专利中简单地将吸附载体与作为配体的抗体偶联结合，难以对配体表面的尺寸和几何形状进行控制，进而影响了配体的识别能力。因此，当前仍有必要寻求抗体的替代品，并改进吸附载体和配体间的连接方式，以改善吸附剂的性能。

有鉴于此，有必要设计一种改进的乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法，以解决上述问题。

发明内容

针对上述现有技术的缺陷，本发明的目的在于提供一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂及其制备方法与应用。通过合成DNA纳米材料，并将其作为连接适配子和吸附载体的中间结构，在稳定连接适配子和吸附载体的同时，有效提高了吸附剂的吸附效率，从而实现对乙型肝炎表面抗原的高效吸附，以降低血液中乙型肝炎表面抗原的含量。

为实现上述目的，本发明提供了一种基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂的制备方法，包括如下步骤：

S1、合成DNA纳米材料；

S2、将步骤S1合成的所述DNA纳米材料回收并纯化后，与适配子混合均匀，孵育后得到连接有适配子的DNA纳米材料，溶于缓冲溶液中备用；

S3、将吸附载体置于孵育管中，再加入步骤S2得到的溶于缓冲溶液的所述连接有适配子的DNA纳米材料，充分反应后得到基于纳米结构的乙型肝炎病毒吸附剂。

作为本发明的进一步改进，在步骤S1中，所述DNA纳米材料的合成具体包括如下步骤：