[发明专利]一种逆转间充质干细胞衰老的方法及应用

说明书

本发明提供了一种逆转间充质干细胞衰老的方法及应用，其中，所述方法包括：提供老化的间充质干细胞；提供包括TGF‑βRI激酶抑制剂II及丙戊酸的工作液；利用所述工作液对所述老化的间充质干细胞进行处理，获得年轻化的间充质干细胞。本发明将TGF‑βRI激酶抑制剂II及丙戊酸进行组合，可以激活衰老的间充质干细胞干性相关基因和增强多向分化潜能，从而有效延缓或逆转体外培养体系中MSC的衰老进程，维持MSC的原始生物学特性，有助于进一步开发和完善MSC的制备工艺，改善MSC的临床治疗效果。

技术领域

本发明涉及组织再生研究领域，特别是涉及一种逆转间充质干细胞衰老的方法及应用。

背景技术

间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)是一类具有强大自我更新能力和多向分化潜能的成体干细胞，具有独特的免疫调节和细胞分泌功能，并可在特定条件下发生多谱系分化为骨、软骨、肌肉及脂肪等细胞，参与修复受损组织器官的结构和功能。

MSC具有来源广泛、取材容易、分离操作简单、免疫原性低、伦理争议少等优势，且其扩增效率高，能够短时间内在体外扩增培养获得足够细胞数量、质量及纯度的临床级干细胞，使得以MSC为基础的干细胞疗法近年来受到广泛关注和应用，为治疗各种难治性疾病、预防和延缓衰老等带来了新的契机。

能够获得足够“数量”和“质量”的干细胞，是MSC作为干细胞药物应用于临床规模化治疗的前提条件。但是，大量基础及临床研究表明，经过体外扩增培养后MSC的生物学属性如植入性、分化潜能、免疫调节活性及归巢能力等均发生显著改变，不仅增加了制备批次间和疗效的不确定性，且因为随着体外传代次数的递增，胞内积累的DNA复制压力和染色体缩合缺陷可引发染色体高频畸变，增加了MSC产品临床输注的潜在风险。

因此，如何能在体外培养体系中延缓或逆转MSC的衰老进程，维持MSC的原始生物学特性，将有助于进一步开发和完善MSC的制备工艺，改善MSC的临床治疗效果。

发明内容

鉴于上述问题，提出了本发明实施例以便提供一种克服上述问题或者至少部分地解决上述问题的一种逆转间充质干细胞衰老的方法。

为了解决上述问题，本发明实施例公开了一种逆转间充质干细胞衰老的方法，其中，包括以下步骤：

提供老化的间充质干细胞；

提供包括TGF-βRI激酶抑制剂II及丙戊酸的工作液；

利用所述工作液对所述老化的间充质干细胞进行处理，获得年轻化的间充质干细胞。

可选地，所述的方法中，所述间充质干细胞包括骨髓间充质细胞或脐带间充质细胞。

可选地，所述的方法中，所述老化的间充质干细胞为传代至第15代的间充质干细胞。

可选地，所述的方法中，所述工作液中，TGF-βRI激酶抑制剂II及丙戊酸的浓度处于生理浓度范围内。

可选地，所述的方法中，所述工作液中，TGF-βRI激酶抑制剂II及丙戊酸的浓度分别为10uM与500uM。

可选地，所述的方法中，所述工作液还包括含胎牛血清、链霉素和青霉素的DMEM/F12培养基。

可选地，所述的方法中，所述培养基中，所述胎牛血清的体积百分数为10％，所述链霉素和所述青霉素的体积百分数均为1％。

可选地，所述的方法中，所述利用所述工作液对所述老化的间充质干细胞进行处理的步骤，包括：

在37.5℃、5％CO2的环境下，利用所述工作液处理所述老化的间充质干细胞，且每隔2天更换一次所述工作液，处理时长为7天左右，直至细胞形态变为长梭形。