[发明专利]苏木素-碱性复红-苦味酸染色试剂盒及其染色方法在审
申请号: | 202011643069.8 | 申请日: | 2020-12-30 |
公开(公告)号: | CN112816296A | 公开(公告)日: | 2021-05-18 |
发明(设计)人: | 王守立 | 申请(专利权)人: | 苏州堪赛尔医学检验有限公司 |
主分类号: | G01N1/31 | 分类号: | G01N1/31 |
代理公司: | 苏州隆恒知识产权代理事务所(普通合伙) 32366 | 代理人: | 周子轶 |
地址: | 215000 江苏省苏州市工业*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 苏木 碱性 苦味酸 染色 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种苏木素-碱性复红-苦味酸染色试剂盒,其特征在于,包括:Harris苏木素液、碱性复红液和苦味酸丙酮液;其中:
所述Harris苏木素液的制备方法包括:将Harris苏木素加入无水乙醇中以获得溶液A,将硫酸铝钾加入蒸馏水中充分溶解以获得溶液B,将溶液A和溶液B以1:20的体积比混合以获得溶液C,向溶液C中加入氧化汞并混合后静置12~24小时以获得溶液D,向溶液D中加入柠檬酸并混合均匀,获得所述Harris苏木素液,其中,以质量百分比计,所述Harris苏木素液中包含Harris苏木素0.01~0.03%;
所述碱性复红液的制备方法包括:将碱性复红加入蒸馏水中以获得所述碱性复红液,其中,以质量百分比计,所述碱性复红液中包含碱性复红0.08~0.12%;
所述苦味酸丙酮液的制备方法包括:将苦味酸加入丙酮中以获得所述苦味酸丙酮液,其中,以质量百分比计,所述苦味酸丙酮液中包含苦味酸0.08~0.12%。
2.根据权利要求1所述的苏木素-碱性复红-苦味酸染色试剂盒,其特征在于,所述Harris苏木素液的制备方法包括:将2.5克Harris苏木素加入25毫升无水乙醇中以获得溶液A,将22硫酸铝钾加入500毫升蒸馏水中充分溶解以获得溶液B,将上述溶液A和上述溶液B混合以获得溶液C,向所述溶液C中加入1.25克氧化汞并混合后静置12~24小时以获得溶液D,向溶液D中加入2克柠檬酸并混合均匀,获得所述Harris苏木素液。
3.根据权利要求1所述的苏木素-碱性复红-苦味酸染色试剂盒,其特征在于,所述碱性复红液的制备方法包括:将0.1克碱性复红加入100毫升蒸馏水中以获得所述碱性复红液。
4.根据权利要求1所述的苏木素-碱性复红-苦味酸染色试剂盒,其特征在于,所述苦味酸丙酮液的制备方法包括:将0.1克苦味酸加入100毫升丙酮中以获得所述苦味酸丙酮液。
5.根据权利要求1所述的苏木素-碱性复红-苦味酸染色试剂盒,其特征在于,以质量百分比计,所述碱性复红液中包含碱性复红0.1%,所述苦味酸丙酮液中包含苦味酸0.1%。
6.根据权利要求1所述的苏木素-碱性复红-苦味酸染色试剂盒,其特征在于,所述苏木素-碱性复红-苦味酸染色试剂盒中包括:Harris苏木素液500毫升、碱性复红液100毫升、苦味酸丙酮液100毫升。
7.一种采用如权利要求1至6中任意一项所述的苏木素-碱性复红-苦味酸染色试剂盒染色的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:石蜡切片脱蜡至水洗;
步骤2:将步骤1中获得的石蜡切片浸入所述Harris苏木素液中染色30~35秒,然后采用自来水冲洗300~305秒钟;
步骤3:将步骤2中获得的石蜡切片浸入所述碱性复红液中染色180~185秒钟,然后采用蒸馏水水洗5~10秒钟;
步骤4:对步骤3中获得的石蜡切片进行纯丙酮洗5~10秒钟;
步骤5:采用所述苦味酸丙酮液对步骤4中获得的石蜡切片进行分化5~15秒钟,以使得石蜡切片上无红色染液流下;
步骤6:对步骤5中获得的石蜡切片进行纯丙酮脱水5~10秒钟;
步骤7:依次对步骤6中获得的石蜡切片进行二甲苯透明、中性树脂封固。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,在步骤3中,以质量百分比计,所述碱性复红液中包括碱性复红0.1%。
9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,在步骤5中,以质量百分比计,所述苦味酸丙酮液中包括苦味酸0.1%。
10.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述石蜡切片的厚度介于3~10μm之间。
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