[发明专利]一种具有抑菌活性的细菌素及其生产方法及用途在审
申请号: | 202011643864.7 | 申请日: | 2020-12-30 |
公开(公告)号: | CN112608369A | 公开(公告)日: | 2021-04-06 |
发明(设计)人: | 何增国;乔晓妮;孙晓雯;汤伟;唐涛;张军 | 申请(专利权)人: | 中国海洋大学;青岛海洋生物医药研究院股份有限公司;青岛百奥安泰生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/32 | 分类号: | C07K14/32;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/16;C12P21/00;A61K38/16;A61P31/04;C12N1/20;C12R1/07 |
代理公司: | 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) 37264 | 代理人: | 王晓晓 |
地址: | 266000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 具有 活性 细菌 及其 生产 方法 用途 | ||
1.一种具有抑菌活性的细菌素,其特征在于,所述细菌素的分子量为6094Da。
2.根据权利要求1所述的细菌素,其特征在于,所述的细菌素由弯曲芽孢杆菌代谢合成产生。
3.根据权利要求1所述的细菌素,其特征在于,所述弯曲芽孢杆菌来源于西太平洋卡罗琳海山。
4.根据权利要求1所述的细菌素,其特征在于,所述细菌素采用RP-C8检测时于220nm条件下获得特征峰或采用C18柱检测时于280nm条件下得到特征峰。
5.权利要求1所述的细菌素的生产方法,其特征在于,
(1)发酵:将弯曲芽孢杆菌接种于培养基中,得到含有细菌素的发酵液;
(2)分离:将含细菌素发酵液经离心,收集上清液;上清液经酸沉和/或大孔树脂吸附洗脱,收集活性组分,真空浓缩;
(3)提取:用60-80%饱和度硫酸铵从活性组分中盐析提取细菌素粗提物;
(4)纯化,采用物理手段对细菌素粗提物进行纯化,获得细菌素。
6.根据权利要求5所述的细菌素的生产方法,其特征在于,所述培养基为LBM培养基,所述通气发酵周期为14-120小时。
7.根据权利要求5所述的细菌素的生产方法,其特征在于,所述大孔树脂为D4006型、D3520型大孔树脂。
8.根据权利要求4所述的细菌素的生产方法,其特征在于,所述分离方法为:
(1)将上清液吸附到经过预处理的大孔树脂中,然后按照从低到高浓度的乙醇进行洗脱,分别收集不同浓度的洗脱组分并在40-60℃下浓缩,获得浓缩液;优选的,乙醇的洗脱浓度为40%~90%;
(2)将浓缩液用6M HCl酸化至pH 1.5-5.0,使活性成分在4℃沉淀,用90%乙醇溶解沉淀物。
9.权利要求1所述的细菌素在制备预防和/或治疗致病菌制剂中的用途。
10.根据权利要求9所述的细菌素在制备预防和/或治疗致病菌制剂中的用途,其特征在于,所述细菌素能够抑制金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、粪肠球菌、产气荚膜梭菌。
11.一种用于培养权利要求1或权利要求5所述的细菌素的产生菌的培养基,其特征在于,所述培养基体积占比为酵母粉1-15g/L、氯化钠1-60g/L、胰蛋白胨1-30g/L、葡萄糖1-50g/L、BG11 10-30g/L。
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