[发明专利]一种耐盐转基因大豆事件E8A7027外源插入的片段侧翼序列及应用

说明书

本发明提供了一种本发明涉及植物生物技术领域，尤其是涉及一种耐盐转基因大豆事件E8A7027外源插入的片段侧翼序列及应用。本发明首次公开了耐盐转基因大豆事件E8A7027外源插入的5’端侧翼序列和/或3’端侧翼序列，并根据所述5’端侧翼序列和/或3’端侧翼序列设计了能够用于特异性PCR检测的引物组合物。该引物组合物和特异性PCR检测方法能够在制备检测转基因大豆事件E8A7027的产品中得到应用，实现对转基因大豆E8A7027及其加工产品的安全进行监管。

技术领域

本发明涉及植物生物技术领域，尤其是涉及一种耐盐转基因大豆事件E8A7027外源插入的片段侧翼序列及应用。

背景技术

大豆是我国重要粮油作物，也是畜禽饲料的主要原料之一，近20年我国大豆产业受到国外进口大豆的严重冲击，自1996年由大豆净出口国转变成净进口国，进口量逐年增长，2019年达到8551.1万吨，是当年我国大豆产量的4.72倍。土壤盐碱化是影响大豆产量的重要因素之一，盐胁迫将导致大豆株高、主茎节数、单株荚数、百粒重等关键指标显著下降。在我国盐碱地面积超过3300万公顷，降低盐碱对作物的影响，可增加有效耕地面积，提高粮食总产，为保障国家粮食安全提供支撑。

AgGlpF基因(GenBank登录号KJ679500)是吉林大学张世宏教授团队从嗜盐曲霉中克隆出的一种水甘油通道蛋白基因，经鉴定该基因具有耐盐特性。将AgGlpF基因连接至pYL载体上获得表达载体pYL-AgGlpF，采用农杆菌介导法将外源AgGlpF基因导入受体大豆Willams82，获得了一个耐盐转基因大豆转化体E8A7027，该转化体在250mM NaCl的盐胁迫下，具有良好的耐盐特性。

基于转基因植物的插入位点旁侧序列，建立转化体特异性的检测方法，对转化体及其衍生品系进行特异性检测，是有效开展转基因植物安全监管，保障转基因产业健康发展的重要技术手段，而目前对于耐盐转基因大豆事件E8A7027，并没有能够有效实现特异性PCR检测的旁侧序列。因此，针对耐盐转基因大豆E8A7027，需要获得该转化体的插入位点旁侧序列，并建立特异性检测体系，以满足该转基因事件的监督管理需求。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种耐盐转基因大豆事件E8A7027外源插入的片段侧翼序列，以能够用于对耐盐转基因大豆事件E8A7027进行特异性检测。

本发明的第二个目的在于，将上述提供的耐盐转基因大豆事件E8A7027外源插入的片段侧翼序列应用于耐盐转基因大豆事件E8A7027的特异性检测中。

本发明的第三个目的在于，提供利用上述耐盐转基因大豆事件E8A7027外源插入的片段侧翼序列进行引物设计，从而对耐盐转基因大豆事件E8A7027进行特异性PCR检测的方法，以实现对含有耐盐转基因大豆事件E8A7027的植物安全监管。

本发明的另一个目的在于，提供上述耐盐转基因大豆事件E8A7027外源插入的片段侧翼序列和特异性PCR检测方法在制备检测转基因大豆事件E8A7027的产品中的应用。

为解决上述技术问题，实现上述目的，本发明特提出以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种转基因大豆事件E8A7027外源插入的片段侧翼序列，所述片段侧翼序列包括事件E8A7027的5’端侧翼序列和/或事件E8A7027的3’端侧翼序列。