[发明专利]调控异化金属还原菌电子流的方法在审
| 申请号： | 202011643969.2 | 申请日： | 2020-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN112608922A | 公开（公告）日： | 2021-04-06 |
| 发明（设计）人： | 俞汉青;李杰;汤强;刘东风 | 申请（专利权）人： | 中国科学技术大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N1/21;C02F3/34;B09C1/10;C12R1/01;C02F101/22 |
| 代理公司： | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人： | 崔亚松;张莹 |
| 地址： | 230026 安*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 调控 异化 金属 还原 电子流 方法 | ||
1.一种基于CRISPR-ddAsCpf1调控异化金属还原菌电子流的方法，包括如下步骤：
(A)初步选择与能量代谢有关的系列基因；
(B)构建靶向所述系列基因的crRNA库；
(C)将含有crRNA库的质粒和编码ddAsCpf1的质粒转入异化金属还原菌内，并筛选能够调控异化金属还原菌的电子流的有效基因；
(D)通过调控所述有效基因的表达来调控异化金属还原菌电子流。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述与能量代谢有关的系列基因为细胞色素基因。
3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述含有crRNA库的质粒为由组成型启动子PCN表达crRNA的pECR质粒。
4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述编码ddAsCpf1的质粒为由IPTG诱导型Plac启动子表达ddAsCpf1的pEAC01质粒。
5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述异化金属还原菌为希瓦氏MR-1细菌(Shewanella oneidensis MR-1)。
6.根据权利要求1所述的方法，其中，利用WO3纳米探针表征所述异化金属还原菌的胞外电子传递能力变化。
7.一种提高细菌还原污染物能力的方法，包括利用权利要求1-6任一项所述方法筛选能够调控异化金属还原菌的电子流的有效基因，并通过抑制所述有效基因的表达来提高所述异化金属还原菌的胞外电子传递能力。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述异化金属还原菌为希瓦氏MR-1细菌(Shewanella oneidensis MR-1)。
9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述污染物为六价铬，所述有效基因选自SO0717、napB、dmsE、SO2930和nrfA中的一种或多种。
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