[发明专利]一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法

说明书

本发明公开了一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法，包括以下步骤：S1：先通过消毒水对成熟的玉米种子进行浸泡消毒，并用蒸馏水冲洗干净，风干处理；S2：将玉米种子的幼胚在预培养基中进行预培养，得到预培养后的成熟胚；S3：采用基因枪法将含有目的基因的载体轰击至成熟胚中；S4：将成熟胚放置成熟培养基中进行培养得到幼苗，本发明采用成熟的玉米种子作为材料，不仅便于寻找材料同时成本低便于操作，同时利用基因枪轰击法探索玉米的高效遗传转化技术，提供了一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法，该方法为玉米的遗传转化提供一个新的技术平台，在玉米遗传转化的研究方面具有重要的作用及广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及植物转基因技术领域，具体是一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法。

背景技术

玉米是禾本科的一年生草本植物。又名苞谷、苞米棒子、玉蜀黍、珍珠米等。原产于中美洲和南美洲，它是世界重要的粮食作物，广泛分布于美国、中国、巴西和其他国家。据农业部统计，2017/2018年度我国玉米供需缺口430万吨，根据玉米行业发展趋势报告分析，在2016-2030年期间中国玉米产量的增长速度会有所下降，而玉米总消费量的增长速度将会明显超出产量的增长速度，国内供需缺口将会进一步扩大。若在不扩大种植面积的情况下，应对玉米的需求趋势而言，玉米生产方式方法则需不断优化升级。随分子育种技术的发展，借助分子辅助育种、转基因技术、基因编辑技术等现代育种技术与传统育种技术的综合应用，可对抗除草剂、抗虫、抗病、品质、产量等农艺性状的改良提供有力的助推。

目前应用最普遍的植物基因的遗传转化方法主要有农杆菌介导法和基因枪法。农杆菌介导转化存在诸多难题，不仅转化周期长且转化率低；而基因枪转化法是借助高速运动的金属微粒使附着于其表面的核酸分子穿过受体的细胞壁，释放出的DNA分子随机整合到基因组中，通过细胞和组织培养再生植株。基因枪法受体类型广泛；操作简便快速；一次处理可使许多细胞转化。

针对上述问题，现在设计一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种基因枪介导的玉米骨干自交系的遗传转化方法，包括以下步骤：

S1：先通过消毒水对成熟的玉米种子进行浸泡消毒，并用蒸馏水冲洗干净，风干处理；

S2：将玉米种子的幼胚在预培养基中进行预培养，得到预培养后的成熟胚；

S3：采用基因枪法将含有目的基因的载体轰击至成熟胚中；

S4：将成熟胚放置成熟培养基中进行培养得到幼苗。

作为本发明再进一步的方案：所述S1中的消毒水内含有6％浓度的NaClO和2％浓度的NaCl，所述玉米种子需要在消毒水中浸泡25分钟。

作为本发明再进一步的方案：所述S2中的预培养基由溶质和溶剂组成，溶质及其在预培养基中的浓度为0.6mg/IBA，1.7g/LKNO3，0.22g/LKH2PO4，0.003g/LH3BO3和25g/L蔗糖，溶剂为水。

作为本发明再进一步的方案：所述S2中幼胚的预培养需要在25℃的黑暗环境下培养5天。

作为本发明再进一步的方案：所述S3中基因枪轰击的参数设置为，DNA浓度：2-4μg/μl；轰击次数：1-3次；目标距离：2-5cm；轰击压力：1050-1400psi；真空度：25-30mmH。