[发明专利]一种黄花蒿的组织培养方法以及培养基组合

说明书

本发明公开了一种黄花蒿的组织培养方法以及培养基组合，涉及黄花蒿组织培养基技术领域。该组织培养方法包括：步骤(a)：将黄花蒿外植体置于愈伤组织分化培养基中进行愈伤组织诱导分化培养以得到带丛生芽芽点的愈伤组织；其中，所述愈伤组织分化培养基的成分包括：MS+2.0～2.5mg/L 6‑BA+0.2～0.3mg/L NAA+6.8‑7.2g/L琼脂+28‑32g/L蔗糖，pH值为5.8～6.0。该组织培养方法具有培养周期短，生长速率快，成苗率高，成本低等特点，有效提高黄花蒿优良品种生产速率，具有黄花蒿优质种苗快速繁殖生产的实用性。

技术领域

本发明涉及黄花蒿组织培养基技术领域，具体而言，涉及一种黄花蒿的组织培养方法以及培养基组合。

背景技术

青蒿药材基原植物黄花蒿(Artemisia annua L.)，又名苦蒿、黄花蒿，菊科蒿属一年生草本植物，为我国传统中药，有两千多年的记载历史，最早见于春秋战国时期的《五十二病方》。青蒿的主要有效成分青蒿素是治疗疟疾的首选药物，被世界卫生组织确认为目前全球治疗疟疾唯一安全、有效的新型药品。黄花蒿广布于欧洲及亚洲，欧洲中部、东部、南部及亚洲北部、中部、东部分布最多。全世界蒿属植物约350种，中国有186种，44变种，但只有黄花蒿中含青蒿素。世界大部分地区的黄花蒿中青蒿素含量低于0.2％，我国黄花蒿资源中青蒿素含量由北到南逐渐增高，秦岭-淮河以北部分地区青蒿素含量均低于0.6％，而以南部分地区青蒿素含量较高。由于全球优质黄花蒿资源主要集中在中国的秦岭-淮河以南部分地区，如海南、贵州、广西、湖南等省，在资源上我国具有极显著的优势，成为青蒿素的主要原料供应国。

采用组织培养技术可以短时间内大量地培养出黄花蒿苗，但传统黄花蒿组织培养过程中，外植体形成愈伤组织然后再分化形成不定芽的过程较为漫长，周期长。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种黄花蒿的组织培养方法。该组织培养方法具有培养周期短，生长速率快，成苗率高，成本低等特点，有效提高黄花蒿优良品种生产速率，具有黄花蒿优质种苗快速繁殖生产的实用性。

本发明的另一目的在于提供用于黄花蒿组织培养的培养基组合。采用该培养基组合对黄花蒿进行组织培养，具有培养周期短，生长速率快，成苗率高，成本低等特点，有效提高黄花蒿优良品种生产速率。

本发明是这样实现的：

一方面，本发明提供了一种黄花蒿的组织培养方法，其包括：

步骤(a)：将黄花蒿外植体置于愈伤组织分化培养基中进行愈伤组织诱导分化培养以得到带丛生芽芽点的愈伤组织；

其中，所述愈伤组织分化培养基的成分包括：MS+2.0～2.5mg/L 6-BA+0.2～0.3mg/L NAA+6.8-7.2g/L琼脂+28-32g/L蔗糖，pH值为5.8～6.0。

本发明提供的黄花蒿的组织培养方法通过对愈伤组织分化培养基的成分及其用量进行合理科学配置，将其用于诱导黄花蒿外植体形成愈伤组织的过程中，可在愈伤组织形成的初期即在外植体出现很小的愈伤组织小点的时候就可以诱导愈伤组织分化形成丛生芽芽点，进而避免了需要形成较大块愈伤组织的时间以及避免了再单独诱导愈伤组织分化形成丛生芽的步骤，显著缩短外植体形成丛生芽的周期，进而缩短了这个组织培养过程的时间，可在短时间内快速繁殖得到大量的黄花蒿幼苗。

黄花蒿不同产地和品种之间青蒿素含量差别较大，青蒿素含量在0.2％～2％之间，且黄花蒿为异花授粉植物，后代分化较大，通过组培方式可以迅速固化、扩繁和保存优良种苗。针对黄花蒿杂合度高、品种分化严重的问题，本发明的组织培养方法为快速固化、扩繁和大量保存具有优质性状的黄花蒿种苗提供了可能。

本发明提供的方法可保证在一年四季中都能获得黄花蒿植株，建立的快速繁殖体系可解决在优良种苗或繁殖材料较少时尤其是优选的单株较少时，短时间内难以得到大量优选种苗的技术难题，有助于加快人工选育的进程。