[发明专利]一种牦牛降压肽及其制备方法有效
申请号: | 202011644080.6 | 申请日: | 2020-12-30 |
公开(公告)号: | CN112552394B | 公开(公告)日: | 2023-03-21 |
发明(设计)人: | 黄彪;雷绍南;刘惠考;李金 | 申请(专利权)人: | 青海瑞肽生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/78 | 分类号: | C07K14/78;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C12P21/06;A61K38/39;A61P9/12;A23L33/18 |
代理公司: | 长沙新裕知识产权代理有限公司 43210 | 代理人: | 吴越 |
地址: | 817000 青海省海西蒙古族藏族自治州德令哈市*** | 国省代码: | 青海;63 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 牦牛 降压 及其 制备 方法 | ||
本发明属于生物活性肽领域,具体涉及一种耗牛降压肽及其制备方法。本发明耗牛降压肽为七肽,其氨基酸序列为Glu‑Gly‑Leu‑Arg‑Gly‑Pro‑Arg,分子量为783.89Da,本发明耗牛降压肽是从牦牛副产物中提取分离纯化后制得。该产品具有较高的ACE活性,能够有效的降低血压,且安全高,没有明显的毒副作用,原料来自食源性动物,在制备降血压药物或降血压保健食品中有较好的应用前景。
技术领域
本发明涉及生物活性肽领域,具体涉及一种牦牛降压肽及其制备方法。
背景技术
高血压(Hypertension)是一种常见的心血管疾病,是全世界范围内的公共卫生问题,严重危害人类健康。随着生活方式和饮食习惯的改变,高血压的患病率以持续上升的趋势增加,据估计到2025年,全世界高血压患者人数将增到约16亿,而我国将是世界上高血压患者人数最多的国家。因此,预防和治疗高血压疾病的任务迫在眉睫,研究开发多种低毒副作用、高降血压活性的新型药物在我国具有重大的意义。
ACE抑制肽又称为降压肽,是一类能够抑制血管紧张素转化酶活性的多肽,在当前临床上被评定为治疗高血压效果强,毒副作用小的手段。目前化学合成的ACE抑制剂类药物卡托普利、阿拉普利等临床上有一定的副作用和药物依赖性。而酶解食源性蛋白获得的ACE抑制肽不仅可以降低血压,而且安全高,没有明显的毒副作用,可以替代药物以功能性食品的形式用于辅助治疗高血压,是近年来科研人员持续关注的研究热点之一。
食源性降压肽的主要来源有乳蛋白、动物蛋白、植物蛋白以及发酵食品等。对于动物蛋白,其中海洋生物研究较多,而陆地牦牛副产物提取报道较少,其具体的降压肽序列鉴定更是罕见报道。我国是世界上拥有牦牛头数最多的国家,约占全世界的85%,大都繁衍生息在我国青藏高原及周围3000米以上的高寒地区,对于牦牛副产物及废弃物的综合利用方面仍处于起步阶段,本发明从牛副产物中开发降压肽进一步拓展牦牛副产物的精深加工,同时为开发食源性降压肽药物提供一种新的开发思路。
发明内容
针对上述问题,本发明的目的在于提供一种牦牛降压肽及其制备方法,本发明以牦牛副产物为原料,提取具有降压活性的牦牛降压肽,提取得到的牦牛降压肽毒副作用低,人体吸收效率高,具有抑制血管紧张素转换酶活性的作用,在制备降血压药物或降血压保健食品中有较好的应用前景。
本发明通过下述技术方案实现。
一种降压肽为七肽,其氨基酸序列为Glu-Gly-Leu-Arg-Gly-Pro-Arg,分子量为783.89Da,能明显的抑制血管紧张素转换酶的活性,在食源性降压肽药物或保健品开发方面具有良好的应用前景。
上述牦牛降压肽的制备方法,其特征在于,具体包括以下步骤:
步骤S1,酶解
将牦牛副产物经预处理后,用复合酶解液酶解4~6h,之后高温灭酶,冷却至常温,离心收集上清液,冷冻干燥制得胶原蛋白肽冻干粉;
步骤S2,超滤
将步骤S1制得的胶原蛋白肽冻干粉用超纯水溶解,然后用截留分子量为3000Da的超滤膜进行分离纯化,将超滤获得的3000Da以下的组分冷冻干燥即得目标降压肽;
步骤S3,分离纯化
A、将步骤S2制备的目标降压肽用半制备液相色谱进行第一次分离纯化,收集不同吸收峰组分的洗脱液进行第一次ACE抑制活性测定,筛选出ACE抑制活性最高的组分;
B、将步骤A筛选出的组分采用半制备液相色谱进行第二次分离纯化,收集不同吸收峰组分的洗脱液进行第二次ACE抑制活性测定,筛选出ACE抑制活性最高的组分;
C、将步骤B筛选出的组分采用分析型液相色谱进行第三次分离纯化,不同吸收峰组分的洗脱液进行第三次ACE抑制活性测定,筛选出ACE抑制活性最高的组分,即为本发明牦牛降压肽。
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