[实用新型]共培养装置

说明书

一种共培养装置，包括盛有培养液A的培养室、盛有培养液B的培养皿和盛有呼吸道上皮细胞的培养小室，在培养皿底部有免疫细胞或微生物，培养皿中插有培养室，培养室中插有培养小室，培养小室底壁为孔径0.4微米的聚碳酸酯膜，培养室底壁为孔径0.1‑0.22微米的聚碳酸酯膜，培养液A为BEGM支气管上皮细胞培养基，培养液B为免疫细胞培养基或微生物培养基。呼吸道上皮细胞与免疫细胞或微生物共培养时，一方面培养室底壁在一定程度上限制了双侧培养液的扩散速度，可减缓培养液B与培养液A的互相混合速度，减小培养液B对呼吸道上皮细胞的不利影响；另一方面培养室底壁可完全阻止培养皿中微生物进入培养室，从而减小了培养皿中内容物对呼吸道上皮细胞的损害。

技术领域

本实用新型涉及一种共培养装置。

背景技术

细胞共培养技术可以进一步模拟体内环境，研究免疫细胞或微生物的分泌因子、代谢产物对呼吸道上皮细胞生理结构和功能的影响，如图1所示的共培养装置，其包括培养皿 1A和transwell培养室1B。呼吸道上皮细胞的体外培养采用气液界面培养技术，是一种将呼吸道组织上的原代上皮细胞分离后，接种到transwell培养小室中进行培养，该培养小室的下层加入培养基，而培养小室中的细胞上层不加培养基直接暴露于空气。呼吸道上皮细胞的培养基为一种特殊的无血清培养基(BEGM支气管上皮细胞培养基)，针对性很强，与其他常规培养基的成分区别较大。并且由于transwell培养小室上层不加培养基，因此呼吸道上皮细胞的共培养不能采用图1所示装置。目前无呼吸道上皮细胞相关的共培养装置可用。

如果利用图1装置进行呼吸道上皮细胞与微生物共培养，则微生物极易穿过transwell 培养小室的底壁感染呼吸道上皮细胞，导致细胞死亡。如果利用图1装置进行呼吸道上皮细胞与免疫细胞共培养，由于二者培养基不通用，且成分区别大，会损害呼吸道上皮细胞的生理特性。我们实验发现，利用图1装置进行呼吸道上皮细胞与免疫细胞共培养，即在 transwell培养小室的下层加入混合培养基(呼吸道上皮细胞BEGM培养基与免疫细胞10％血清1640培养基＝1:1混合)，虽然两种细胞能够短暂共存，但是含10％血清的1640培养基严重损害了呼吸道上皮细胞的成活率和纯度：如图2所示，与单纯用BEGM培养基培养相比，图1装置的共培养导致呼吸道上皮细胞的成活率下降了8.6％，在统计学上有显著差异(p0.01)；细胞纯度下降了17.5％，在统计学上有显著差异(p0.01)。从而图1装置无法用于研究免疫细胞或微生物对呼吸道上皮细胞的作用。

实用新型内容

本实用新型的目的在于提供一种有效实现呼吸道上皮细胞的共培养装置。

为达成上述目的，本实用新型采用以下技术方案：

包括盛有培养液B的培养皿、盛有培养液A的培养室和盛有呼吸道上皮细胞的培养小室，在培养皿的底部有免疫细胞或微生物，该培养皿中插有培养室，该培养室中插有该培养小室，所述培养小室底壁为孔径0.4微米的滤膜，所述培养室底壁为孔径0.1-0.22微米的滤膜。

优选地，所述培养室的底壁为0.1-0.22微米的聚碳酸酯膜，可完全阻隔培养皿中的微生物进入培养室。

优选地，所述培养小室的底壁为0.4微米的聚碳酸酯膜，可帮助呼吸道上皮细胞吸收下面培养液A的养分。

优选地，培养液A为BEGM支气管上皮细胞培养基，培养液B为免疫细胞培养基或微生物培养基。

优选地，所述培养皿的上端设有六个卡槽，所述培养室的顶端外壁上均匀间隔设有三条支腿A，该三条支腿A插入其中三个卡槽上，在该培养小室的顶端外壁上均匀间隔设置三条支腿B，该三条支腿B插入另外三个卡槽上。