[实用新型]一种两步法核酸扩增、检测用的反应管及反应管套装

说明书

本实用新型公开了一种两步法核酸扩增、检测用的反应管及反应管套装。所述反应管包括管体和盖体，所述盖体包括用于在第一步反应时暂时存放第二反应液的液体盒；所述反应管还包括上盖，所述上盖包括套接部和密封板，所述密封板的底面设有刺破针；套接部的上方还设有环绕所述密封板、用于保护密封板的保护环。通过将第二反应液密封在液体盒中，且由于密封板受到保护环的保护，不容易发生误碰密封板从而刺破密封膜的情况，保障预加第二反应液后反应管在运输、销售等过程中的安全，也可以避免使用时的误操作。需要刺破密封膜，使用特定结构的挤压工具进行操作。

技术领域

本实用新型涉及生物检测技术领域，特别是涉及一种两步法核酸扩增、检测用的反应管及反应管套装。

背景技术

核酸扩增检测技术是开展分子生物学研究的基础，可用于定性、定量地分析和检测微量核酸，其在临床医学、检验医学、分子生物学、基因组学及食品安全等相关的各个领域发挥着重要的作用，是生命科学发展不可或缺的一种重要检验方法。现有核酸扩增技术可根据是否需要温度循环分为两类：第一类为变温扩增体系，包括聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction，PCR)、连接酶链式反应(ligase chain reaction，LRC)等。其中PCR技术因其特异性强，灵敏度高，价格低廉等优点，是目前应用最为广泛的核酸体外扩增技术。但该技术需要特定的仪器，同时对操作人员以及实验条件有一定的专业要求。第二类为等温扩增体系，包括环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermalamplification，LAMP)、滚环扩增技术(Rolling Circle Amplification，RCA)以及重组酶聚合酶扩增技术(Recombinase Polymerase Amplification，RPA)等，该技术无需热循环过程，不需要特殊仪器，但其扩增易产生假阳性。

近年来，CRISPR技术的出现带来了一种更简便灵敏的检测方式。其主要原理是利用Cas酶在体系中guide RNA的引导下与目标序列结合后，便会切换为激活状态，高效的切割体系内其它的单链DNA。在体系内加入含有报告基团的单链DNA探针底物后，Cas蛋白识别到靶序列的存在，就会切割单链DNA探针底物从而释放荧光报告基团产生荧光信号。在目前已知的利用CRISPR检测的体系中，由于受到反应温度的影响，CRISPR体系无法在起始时刻就添加到反应体系中，必须等到反应结束后二次开盖再进行后续添加，极易造成严重的气溶胶污染和假阳性问题，并且使得整个检测操作过程变得复杂和繁琐。

申请人前期申请的，公开号为CN111334425A的发明专利申请公开了一种核酸扩增结合CRISPR检测的双系统耦联用反应管、双系统耦联方法，所述双系统耦联用反应管，包括管体及与管体配合密封的盖体，管体的内腔包括下部的反应区，以及上部的储存区；所述储存区设有用于在核酸扩增时暂时存放CRISPR检测试剂的储存室，以及在核酸扩增完成后将CRISPR检测试剂从储存室中释放到反应区的释放机构。上述现有技术中要么储存室开口设置，第一步反应完全后通过倾斜、倒置的方式将CRISPR检测试剂从储存室中释放到反应区，由于储存室开口设置，可能会意外将两步反应的液体混合，影响结果；或者储存室密封，但是通过盖体直接按压使CRISPR检测试剂从储存室中释放到反应区，容易意外触碰到盖体上对应区域，将CRISPR检测试剂从储存室中释放到反应区，影响结果。

实用新型内容

本实用新型针对现有技术中存在的上述不足，提供了一种储存第二反应液的空间为封闭设置，且用于将第二反应液释放的结构不容易被误操作的两步法核酸扩增、检测用的反应管。

一种两步法核酸扩增、检测用的反应管，包括用于加第一反应液的管体及与管体配合密封的盖体，所述盖体包括用于在第一步反应时暂时存放第二反应液的液体盒，所述液体盒的底面具有供第二反应液流入管体的第一开口，所述液体盒的顶面设有用于向液体盒中加入第二反应液的第二开口，加第二反应液前使用密封膜密封第一开口；

所述液体盒具有伸入管体中与管体口部插接配合的塞子部，以及位于管体外部的封口部，所述第一开口位于塞子部的底面，所述第二开口位于封口部的顶面；