[实用新型]一种用于细胞蛋白样品提取的混匀装置有效
申请号: | 202021612856.1 | 申请日: | 2020-08-06 |
公开(公告)号: | CN212964983U | 公开(公告)日: | 2021-04-13 |
发明(设计)人: | 刘晓华;喻坤 | 申请(专利权)人: | 长沙仪秀兴智能科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/531 | 分类号: | G01N33/531 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 410219 湖南省长沙市望城区月亮*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 细胞 蛋白 样品 提取 装置 | ||
本实用新型涉及一种用于细胞蛋白样品提取的混匀装置,包括培养皿放置台、放置台角度调节装置和旋转装置,所述放置台角度调节装置包括上板、底座和伸缩装置,所述上板两端设有铰座,所述底座一端与所述上板一端的所述铰座铰接,另一端与所述伸缩装置的一端铰接,所述伸缩装置的另一端与所述上板另一端的所述铰座铰接,所述旋转装置安装在所述上板上,所述培养皿放置台与所述旋转装置一端相连,所述培养皿放置台用于放置培养皿,所述放置台角度调节装置用于调节所述培养皿放置台与所述机座的倾斜角度,所述旋转装置用于驱动所述培养皿放置台旋转,从而使培养皿旋转。
技术领域
本实用新型属于蛋白质样品制备技术领域,涉及一种生物化学实验蛋白质免疫印迹(Western Blot)流程中细胞蛋白样品制备的辅助装置,具体说是一种用于细胞蛋白样品提取的混匀装置。
背景技术
Western Blot (中文名为蛋白质免疫印迹法)检测技术在蛋白分子信号通道、蛋白组学等基础研究和疾病标志物的研究应用领域被使用的越来越广泛,其目的为定性检测某种蛋白质表达与否或半定量某种蛋白的表达量高低。它是用已标记的抗体对组织细胞内相应的抗原进行检测,达到对感染性疾病的病因诊断、对肿瘤的分类、鉴别诊断以及为肿瘤的预后和基因治疗提供重要参考依据的目的。科学规范的操作对保证免疫组织化学制片质量,提高临床病理诊断水平,促进病理学研究工作的发展有着极其重要的意义。
Western Blot第一步便是蛋白样品制备,蛋白质的提取在Western Blot流程中至关重要,蛋白提取大致可以分为三个步骤:第一步获取材料,第二步分离目的细胞或组织成份并破碎,第三步就是进行裂解制样。
细胞蛋白样品制备的具体操作步骤为:
1.观察细胞状态到达适合提蛋白时,去除培养液;
2.每瓶细胞加3ml 4℃预冷的PBS(0.01M pH7.2~7.3),PBS的中文名为磷酸缓冲盐溶液,平放轻轻摇动1 min洗涤细胞,然后弃去洗液,重复以上操作两次,共洗细胞三次以洗去培养液,将PBS弃净后把培养瓶置于冰上;
3.按1ml裂解液加10μl PMSF(100mM),PMSF的中文名为:苯甲基磺酰氟,摇匀置于冰上,PMSF要摇匀至无结晶时才可与裂解液混合;
4.每瓶细胞加400μl含PMSF的裂解液,于冰上裂解30min,为使细胞充分裂解培养瓶要经常来回摇动;
5.裂解完后,用干净的刮棒将细胞刮于培养瓶的一侧,然后用枪将细胞碎片和裂解液移至1.5 ml离心管中,整个操作尽量在冰上进行;
6.于4℃下12000rpm离心 5 min;
7.将离心后的上清分装转移倒 0.5 min 的离心管中放于-20℃保存,千万不能吸到1.5 ml离心管下部的白色絮状沉淀。
目前,细胞样品制备由人工进行操作,而往细胞样品添加PBS溶液和裂解液与PMSF混合溶液时,需要对培养瓶经常来回摇动,以使细胞洗净或充分裂解,此操作持续时间较长,对操作人员的要求比较高,并且涉及到有毒物质PMSF,影响操作人员身体健康。
实用新型内容
针对上述问题,本实用新型提供一种用于细胞蛋白样品提取的混匀装置,能够自动使培养皿持续摆动,使溶液与细胞能充分接触,降低对操作人员的要求和劳动强度,避免有毒物质对操作人员的伤害。
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