[实用新型]一种用于细胞蛋白样品提取的上清检测装置

说明书

本实用新型涉及一种用于细胞蛋白样品提取的上清检测装置，包括离心管存放腔、激光发射装置、激光接收装置和控制系统，离心管存放腔顶部设有容腔用于放置离心管，相对的两侧各开有条状孔，激光发射装置与激光接收装置分别固定在离心管存放腔的开有条状孔的两侧，激光发射装置用于发射激光信号，激光信号通过条状孔到达激光接收装置，激光接收装置用于接收激光发射装置发射过来的激光信号，控制系统根据激光接收装置接收的信号判断离心管中上清的高度。本实用新型能够自动检测离心管中上清的位置，适用于细胞蛋白样品的自动化提取。

技术领域

 本实用新型属于蛋白质样品制备技术领域，涉及一种生物化学实验蛋白质免疫印迹（Blot Western）流程中细胞蛋白样品制备的辅助装置，具体说是一种用于细胞蛋白样品提取的上清检测装置。

背景技术

Western Blot 检测技术在蛋白分子信号通道、蛋白组学等基础研究和疾病标志物的研究应用领域被使用的越来越广泛， 其目的为定性检测某种蛋白质表达与否或半定量某种蛋白的表达量高低。 它是用已标记的抗体对组织细胞内相应的抗原进行检测， 达到对感染性疾病的病因诊断、 对肿瘤的分类、 鉴别诊断以及为肿瘤的预后和基因治疗提供重要参考依据的目的。 科学规范的操作对保证免疫组织化学制片质量， 提高临床病理诊断水平， 促进病理学研究工作的发展有着极其重要的意义。

Western Blot第一步便是蛋白样品制备，蛋白质的提取在Western Blot流程中至关重要，蛋白提取大致可以分为三个步骤：第一步获取材料，第二步分离目的细胞或组织成份并破碎，第三步就是进行裂解制样。

细胞蛋白样品制备的具体操作步骤为：

1.观察细胞状态到达适合提蛋白时，去除培养液；

2.每瓶细胞加3ml 4℃预冷的PBS（0.01M pH7.2～7.3），PBS的中文名为磷酸缓冲盐溶液，平放轻轻摇动1 min洗涤细胞，然后弃去洗液，重复以上操作两次，共洗细胞三次以洗去培养液，将PBS弃净后把培养瓶置于冰上；

3.按1ml裂解液加10μl PMSF（100mM），PMSF的中文名为：苯甲基磺酰氟，摇匀置于冰上，PMSF要摇匀至无结晶时才可与裂解液混合；

4.每瓶细胞加400μl含PMSF的裂解液，于冰上裂解30min，为使细胞充分裂解培养瓶要经常来回摇动；

5.裂解完后，用干净的刮棒将细胞刮于培养瓶的一侧，然后用枪将细胞碎片和裂解液移至1.5 ml离心管中，整个操作尽量在冰上进行；

6.于4℃下12000rpm离心 5 min；

7.将离心后的上清分装转移倒 0.5 min 的离心管中放于-20℃ 保存，千万不能吸到1.5 ml离心管下部的白色絮状沉淀。

细胞碎片和裂解液在离心机离心后形成上部的上清和下部的白色絮状沉淀，然后再利用移液枪将上部的上清转移到离心管中进行保存，但是不能吸到下部的白色絮状沉淀，目前上清的吸取靠人工进行操作，靠肉眼观察白色絮状沉淀的位置，对操作人员的要求较高，易出错，不适用自动化。

实用新型内容

针对上述问题，本实用新型提供一种用于细胞蛋白样品提取的上清检测装置，能够自动检测离心管中上清的位置，避免移液枪吸到下部的白色絮状沉淀，稳定不易出错，适用于细胞蛋白样品的自动化提取。