[实用新型]一种液相色谱分离烟草高低丰度蛋白的分离装置及分析系统

说明书

本实用新型提供一种液相色谱分离烟草高低丰度蛋白的分离装置及分析系统。该装置包括第一维色谱单元、第二维色谱单元和馏分收集器；所述第一维色谱单元包括第一泵、至少6个接口的第一多通阀、第一色谱柱、第一检测器和至少4个接口的第二多通阀；所述第二维色谱单元包括第二泵、至少三个接口的第三多通阀、至少2个通道的分流器、至少2个捕集柱的捕集柱阵列、至少2个分流阀的分流阀阵列和至少2个第二色谱柱的第二色谱柱阵列。该分析系统包括该分离装置、蛋白含量测定单元、高丰度蛋白MS分析单元、和低丰度蛋白LC‑MS分析单元。该分离装置及分析系统能够快速高效地分离及分析鉴定烟草高丰度和低丰度蛋白。

技术领域

本实用新型涉及烟草蛋白分析技术领域，具体涉及一种液相色谱分离烟草高低丰度蛋白的分离装置及分析系统。

背景技术

在植物生化研究领域，烟草作为重要的模式植物被广泛研究。2011年烟草首张全基因组绘制成功，烟草进入蛋白组学研究，植物基因常有四倍体甚至八倍体，因此植物蛋白的转录翻译更为复杂。烟草蛋白种类繁多，含量差异较大，传统的蛋白分析鉴定方法在分析低丰度蛋白时，受到高丰度蛋白的影响较大，对检测结果产生不利影响。目前，植物蛋白组检测技术主要有双向电泳(2-DE)、双向荧光差异凝胶电泳(DIGE)、同位素亲和标签(ICAT)、同重同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolutequantification，iTRAQ)。 2-DE方法由于重复性差，逐渐被DIGE法取代。DIGE法仍存在蛋白质点被污染的问题。ICAT 技术将活性反应基团引入，提高蛋白鉴定的灵敏度，但标记效率低，制约了蛋白鉴定的准确性和重复性。iTRAQ仅能对标记上的多肽及相应蛋白进行分析，限制了检测目标蛋白的范围。

实用新型内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本实用新型的目的在于提供一种液相色谱分离烟草高低丰度蛋白的分离装置及分析系统。所述分离装置通过阵列式二维色谱装置进行分离，多根色谱柱同时分离检测效率高，具有高通量、分离效果良好的特点。所述分析系统采用阵列式多维液相色谱串联质谱，将高低丰度蛋白分别进行分析鉴定，并将检测结果相结合，得到完整的烟草蛋白的生物学信息。该分离装置及分析系统能够快速、高效地分离及分析鉴定烟草高丰度和低丰度蛋白，鉴定出的低丰度蛋白信息丰富，高丰度蛋白能够实现在阵列二维色谱中位置定位。

为实现上述目的及其他相关目的，本实用新型第一方面提供一种液相色谱分离烟草高低丰度蛋白的分离装置，包括第一维色谱单元、第二维色谱单元和馏分收集器；

所述第一维色谱单元包括第一泵、至少6个接口的第一多通阀、第一色谱柱、第一检测器和至少4个接口的第二多通阀；

所述第二维色谱单元包括第二泵、至少三个接口的第三多通阀、至少2个通道的分流器、至少2个捕集柱的捕集柱阵列、至少2个分流阀的分流阀阵列和至少2个第二色谱柱的第二色谱柱阵列；

所述第一多通阀分别与所述第一泵、第一色谱柱的进样端相连通，第一色谱柱的出样端、所述第一检测器、所述第二多通阀沿样品流通方向依次连通；

所述分流阀阵列分别与所述第二多通阀、所述捕集柱阵列、第二色谱柱阵列的进样端相连通，所述第三多通阀分别与所述第二泵、所述分流器相连通，所述分流器与所述捕集柱阵列连通；

所述第二色谱柱阵列的出样端与所述馏分收集器连通。

本实用新型第二方面提供一种阵列式多维液相色谱串联质谱分析烟草高低丰度蛋白的分析系统，包括：

上述分离装置，用于将烟草样品通过阵列式多维液相色谱分离烟草高低丰度蛋白并收集馏分；

蛋白含量测定单元，用于测定经所述分离装置获得的收集馏分的蛋白含量，确定高丰度蛋白所在的馏分和低丰度蛋白所在的馏分；

高丰度蛋白MS或LC-MS分析单元，用于检测每个高丰度蛋白馏分的蛋白质组学信息或全高丰度蛋白馏分的蛋白质组学信息；