[实用新型]一种淋巴细胞分类流式检测分析装置

说明书

本实用新型公开了一种淋巴细胞分类流式检测分析装置，包括，盒体，所述盒体中间设置有立柱，所述盒体内侧壁设置有第一围板，所述立柱周围设置有第二围板，所述第一围板与所述第二围板高度相同，所述第一围板与第二围板将盒体内部空间分为容置层和底层；存放盒，所述存放盒为扇形，所述扇形盒上设置有放置槽，试管放置在放置槽中，所述扇形盒搭在第一围板和第二围板上；盒盖，所述盒盖盖在所述盒体上；该装置可在样本准备过程中荧光染色等步骤都需在相应适宜的避光及温度环境中进行，以获得更为准确有效的流式检测结果。

技术领域

本实用新型涉及分析检测技术领域，尤其是一种淋巴细胞分类流式检测分析装置。

背景技术

流式细胞术(Flow cytometry，FCM)是七十年代发展起来的一项现代细胞分析技术，它集计算机技术、激光技术、液体力学、细胞化学、细胞免疫学于一体，同时具有分析和分选细胞的功能。它不仅可以测量细胞大小、内部颗粒的性状，还可检测细胞表面和细胞浆抗原、细胞内DNA、RNA含量等，可对群体细胞在单细胞水平上进行分析，在短时间内检测分析大量细胞，并收集、储存和处理数据，进行多参数定量分析，能够分类收集，分选某一亚群细胞，分选纯度大于95％。流式细胞术在血液学、免疫学、肿瘤学、药物学、分子生物学等学科均有广泛应用。

流式细胞术在血液病学中的应用主要涉及白细胞、红细胞、血小板及白血病、骨髓瘤、淋巴瘤细胞的免疫表型分析、CD34+细胞计数、淋巴细胞亚群及免疫功能检测、细胞周期与DNA倍体分析、细胞凋亡等诸多方面。免疫荧光染色是使用流式细胞仪进行细胞免疫标志分析的关键步骤，主要包括直接和间接免疫荧光染色两种方法。间接免疫荧光染色是采用特异的无荧光标记的一抗抗体与待测标本反应，经溶血、洗涤后，加入标记荧光的一抗抗体，经孵育、洗涤后上机检测。直接免疫荧光染色是在标记时加入连接着荧光染料的特异抗体，该方法具有操作简单、背景荧光低、信噪比高，可同时标记多色抗体等诸多优点，因此目前广泛应用于各实验室中的是多色直接免疫荧光标记法。

根据标记抗原部位的不同，免疫荧光染色可分为细胞表面和细胞内抗原染色。细胞表面抗原标志物主要是从细胞内合成后表达在细胞膜表面，各种细胞表面抗原或受体的流式细胞表型分析实验操作相对简单，因此在临床应用中最为广泛。除了表达在细胞表面的分子外，细胞内还存在大量分子或待分泌的细胞因子等，它们发挥着重要的生理作用。与细胞膜表面抗原标志物的标记相比，细胞内或核内抗原的标记及细胞内细胞因子的测定首先需要透膜处理，在进行不同抗原标记时，所要求的实验环境有所不同。例如，在进行细胞表面抗原标志物、细胞内或核内抗原标记时，其荧光染料的孵育条件为“室温避光孵育15min”，而在进行细胞内细胞因子染色时，其荧光染料的孵育条件为“4℃避光孵育30min”。

单细胞悬液荧光染色关系着流式分析的精度，应特别注意染料的特性及量效关系，由于免疫荧光染色中还涉及抗体特异性及效价问题，应严格按照实验操作的要求进行。环境温度的升高对荧光染色有明显的影响，可使溶液的粘滞性增加，荧光染料分子的动力增大，荧光淬灭的可能性增大，荧光分子的光子产量降低。如保持温度在 20℃以下，光子产量的变化不受影响，尽量减少染色样本的光照射时间，使检测时的荧光强度不受影响。

在进行流式分析的样本准备过程中，根据标记抗原部位的不同，其实验环境对温度的要求各不同。而样品在添加荧光染料染色后，应该置于避光环境中进行孵育，并尽量减少由染色到上机检验中间实验步骤的过程，以减少染色样本的光照射时间，保证检测时的荧光强度不受影响。目前生物学实验室完成这项操作均是在常规的试管架或流式管架上进行，为达到避光的效果，需将装有样品的试管架或流式管架转移至避光的场所或者容器中，例如抽屉、柜子等。如果实验要求在4℃的温度环境下进行，则还需将装有样品的试管架或流式管架转移至冰箱冷藏室中。上述这些操作不仅会使实验操作更加繁琐，而且会延长染色样本的光照射时间，增加荧光分子淬灭的风险，导致检测结果失真，更有甚者导致实验失败，严重影响后续的研究或者临床诊断。

综上所述，提供一种可为流式细胞分析提供避光及适宜温度环境的实验装置对于获得准确有效的流式检测结果是非常重要的。

发明内容