[发明专利]抗体生产中滴度的在线测量

说明书

本发明涉及一种能够在生物反应器中吸取样品并测量抗体浓度的全自动在线检测的设备和方法。该设备采用了完全自动化的取样以及自动化的亲和柱的吸附和洗脱操作。

优先权和相关申请参考

本申请要求享受35 U.S.C.§119(e)规定的美国专利申请号62/879,942(申请日为2019年7月29日)的优先权权益，其全部内容已通过引用方式合并至本申请。

发明领域

本发明涉及在线监测分析仪器及方法，能够快速自动的测量生物反应器中的单克隆抗体的滴度。所述方法是基于亲和柱的方法，可以自动取样。

发明背景

生物医药行业继续在寻找机会来缩短产品开发周期。同时也致力于提高药物生产的数量，质量和疗效，使其可以对竞争对手的同类产品产生竞争优势。为患者提供高品质产品的关键是生产过程的精确控制，而监测和控制产品的实时质量是实现质量控制的关键。为了实现这一目标，将需要在线分析技术(Process At-line Technology，PAT)付诸实施，使实时的产品质量控制成为可能。

抗体类药物是生物药物中最常见和最重要的药物品种。它们在血液中和其他血液成分一起在体内循环，既可以抵御入侵的病毒等外来物质也可以和药物靶点结合起到治疗作用。目前大多数抗体药物都是基于CHO(中国仓鼠卵巢Chinese Hamster Ovary)细胞的基因工程技术生产。用于抗体大规模生产的生物反应器，通常是两个星期左右生产一个批次。用于测量抗体蛋白浓度(或称为滴度)的分析技术是获取抗体产量数据的手段，在生产流程开发直至商业化生产等的所有研发及生产阶段都是十分必要的。目前的技术通常使用高效液相色谱法(HPLC，High Performance Liquid Chromotopography)，利用ProA(Protein A)亲和柱捕获和洗脱以检测抗体蛋白的信号。虽然有很多的局限性，但它仍然是最主要的分析手段，被认为是“金标准”。为了从生物反应器中取得样品，一般需要将样品从反应器中手动取出。不仅是程序繁琐，而且也有污染生物反应器的危险，并导致整个生产批次的失败。

通过HPLC“黄金标准”方法进行抗体滴度测定，一般无法进行在线测量，生产过程中的及时测量面临挑战。而用自动化的在线分析技术(PAT)测量抗体浓度可以实时监测关键工艺参数的变化对产率的影响。

本发明的概要

本发明提供的设备和方法可以自动化的在单克隆抗体生产中进行在线抗体滴度的测量。

优选的实施方案提供了抗体浓度的测量设备。该设备包括一个壳体，该壳体有一个马达控制的注射器，此注射器通过一个缓冲液阀和中性缓冲液或酸性缓冲液相连，以使ProA亲和柱在中性缓冲液条件下和抗体结合以及酸性缓冲液下和抗体脱离。该设备还提供了连接到所述注射器和多向样品阀的临时存储线圈，用以临时储存抗体样品并递送至ProA柱。多向样品阀包括多个外部阀口并连接到临时存储线圈的连接口。ProA色谱柱也连接到多向样品阀，用以捕获抗体蛋白，洗出杂质，然后释放抗体蛋白质进入紫外检测器。紫外检测器测量洗脱抗体的紫外线信号。废液收集器用以收集废液。