[发明专利]一种感觉神经元细胞的无血清诱导方法

权利要求书

1.LY2157299、RepSox、SB5253334或TEW7179在诱导多能干细胞分化为感觉神经前体细胞及感觉神经元细胞中的应用。

2.权利要求1所述的应用，其中LY2157299、RepSox、SB5253334或TEW7179的用量为55nM-25uM，优选为100nM、300nM、500nM、700nM、900nM、1uM、2.5uM、5uM、7.5uM、10uM、12.5uM、15uM、17.5uM、20uM或22uM。

3.人-NT3或CHIR98014在培养感觉神经元中的应用。

4.权利要求3所述的应用，其中人-NT3的用量为0.1-49ng/ml，或者CHIR98014的用量为0.5nM-3uM。

5.感觉神经元细胞诱导培养基，其特征在于：由50％(v/v)DMEM培养基和50％(v/v)神经基础培养基形成基础培养基，然后添加0.5％-2％(v/v)N2添加剂(优选0.7％、0.9％、1.0％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％(v/v))，0.2％-3.1％(v/v)GS21添加剂或B27添加剂(优选0.4％、0.6％、0.8％、1.0％、1.2％、1.4％、1.6％、1.8％、2.0％、2.2％、2.4％、2.6％、2.8％、3.0％(v/v))，0.1-15mM HEPES缓冲液(优选1、5、10mM)，5-22mM甘氨酸-谷氨酰胺一水合物(优选10、15、20mM)，12-180nM LDN-193189或LDN-1931892HCl(优选20、50、70、80、90、100、110、120、150、170nM)，和55nM-25uM LY2157299、RepSox、SB5253334或TEW7179(优选100nM、300nM、500nM、700nM、900nM、1uM、2.5uM、5uM、7.5uM、10uM、12.5uM、15uM、20uM或22uM)。

6.权利要求5所述的感觉神经元细胞诱导培养基，其特征在于：由50％(v/v)DMEM培养基和50％(v/v)神经基础培养基形成基础培养基，然后添加1％(v/v)N2添加剂，2％(v/v)GS21添加剂或B27添加剂，0.5mM HEPES缓冲液，20mM甘氨酸-谷氨酰胺一水合物，100nMLDN-193189或LDN-1931892HCl，和选自5uM、7.5uM或12.5uM LY2157299、RepSox、SB5253334或TEW7179。

7.权利要求5或6所述的感觉神经元细胞诱导培养基，其中所述诱导培养基的组成如下：由50％(v/v)DMEM培养基和50％(v/v)神经基础培养基形成基础培养基，然后添加1％(v/v)N2添加剂，2％(v/v)GS21添加剂或B27添加剂，0.5mM HEPES缓冲液，20mM甘氨酸-谷氨酰胺一水合物，100nM LDN-193189或LDN-1931892HCl，和选自5uM、7.5uM或12.5uMLY2157299，优选地，所述感觉神经元细胞诱导培养基还添加血清替代物(例如血清白蛋白，转铁蛋白，脂肪酸)，更优选地，所述血清替代物为纯化形式。