[发明专利]一种花生四烯酸的生产方法有效
申请号: | 202080002953.5 | 申请日: | 2020-11-20 |
公开(公告)号: | CN112543811B | 公开(公告)日: | 2023-09-12 |
发明(设计)人: | 王霄凤;陈必钦;严必能;刘子睿 | 申请(专利权)人: | 内蒙古金达威药业有限公司;厦门金达威集团股份有限公司 |
主分类号: | C12P7/6427 | 分类号: | C12P7/6427;C12N1/14;C12Q3/00;C12R1/645 |
代理公司: | 厦门市精诚新创知识产权代理有限公司 35218 | 代理人: | 方惠春 |
地址: | 010206 内蒙*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 花生四烯酸 生产 方法 | ||
1.一种花生四烯酸的生产方法,其特征在于,该方法包括将高山被孢霉依次进行菌株活化、种子扩大培养和发酵培养,且在发酵培养过程中,在线监测OUR并将OUR数值分六个阶段控制,且控制方式如下:0~20h控制在10~40mmol/L·h,20~55h控制在20~80mmol/L·h,55~80h控制在25~100mmol/L·h,80~120h控制在20~90mmol/L·h,120~160h控制在15~70mmol/L·h,160~发酵结束控制在15~60mmol/L·h;和/或,在发酵培养的第100h之后,在线监测发酵液中的ORP并将ORP数值分三个阶段控制,且控制方式如下:100~120h控制在50~100mv,120~160h控制在60~130mv,160h~发酵结束控制在70~150mv。
2.根据权利要求1所述的花生四烯酸的生产方法,其特征在于,所述OUR分九个阶段控制,且控制方式如下:
0~20h控制在10~35mmol/L·h,
20~40h控制在20~70mmol/L·h,
40~55h控制在25~80mmol/L·h,
55~80h控制在25~100mmol/L·h,
80~100h控制在25~90mmol/L·h,
100~120h控制在20~80mmol/L·h,
120~140h控制在20~70mmol/L·h,
140~160h控制在20~65mmol/L·h,
160h~发酵结束控制在15~60mmol/L·h。
3.根据权利要求1所述的花生四烯酸的生产方法,其特征在于,所述ORP分四个阶段控制,且控制方式如下:
100~120h控制在50~100mv,
120~140h控制在60~120mv,
140~160h控制在65~130mv,
160h~发酵结束控制在70~140mv。
4.根据权利要求1~3中任意一项所述的花生四烯酸的生产方法,其特征在于,所述OUR通过调整通气量、转速及罐压中的至少一者得以控制。
5.根据权利要求1~3中任意一项所述的花生四烯酸的生产方法,其特征在于,所述ORP通过调整通气量、转速、罐压、温度及pH值中的至少一者得以控制。
6.根据权利要求1~3中任意一项所述的花生四烯酸的生产方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
(1)菌株活化:将高山被孢霉菌株接入装有灭菌后菌株活化培养基的摇瓶中,在温度25~32℃、转速100~200rpm的条件下培养40~48h,完成菌株活化培养,得到摇瓶种子液;
(2)种子扩大培养:将摇瓶种子液以0.4%~1%的接种量接入装有灭菌后种子培养基的种子罐中,在温度25~32℃、通气量1~2vvm、罐压0.02~0.05MPa的条件下培养30~35h,再以1%~3%的接种量接入装有灭菌后种子培养基的种子罐中,在温度25~32℃、通气量1~2vvm、罐压0.02~0.05MPa的条件下培养20~25h,任选重复培养1~3次,得到种子液;
(3)发酵培养:将种子液以1%~3%的接种量接入装有灭菌后发酵培养基的发酵罐中,在温度20~30℃、通气量1~2vvm、罐压0.02~0.05MPa、搅拌转速0~100rpm的条件下发酵培养150~168h,在发酵培养过程中,在线监测OUR并将其数值控制在预定范围内,和/或,在发酵培养的第100h之后,在线监测发酵液中的ORP并将其数值控制在预定范围内,且在整个发酵过程中将发酵体系的pH值控制在5~7.5。
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