[发明专利]用于RNA的测量的方法和试剂盒

说明书

根据实施方案，具有由SEQ ID NO：1表示的核苷酸序列的miRNA用作用于癌症诊断的标志物。

相关申请的交叉引用

本申请基于2019年6月14日提交的日本专利申请No.2019111432并要求其优先权，其全部内容通过引用并入本文。

领域

本文所述的实施方案总体上涉及用于测量微小RNA的方法和试剂盒。

背景技术

背景

各种技术用于癌症测试。具体的程序包括用于从身体外部捕获内部癌症的图像的方法，诸如X射线测试，超声检查等；用于在显微镜下观察获得的样本中癌细胞的存在的方法(细胞学诊断)；和用于测量血液中的肿瘤标志物的量的方法；等等。在癌症的早期检测中，诊断成像方式可能会遇到困难，因为只有在癌症生长到特定体积时才能检测到癌症；它被其他器官隐藏而无法被发现；取决于癌症周围的环境因素，无法将癌细胞捕获为图像；等等。此外，由于每种癌症的测试方法不同，因此受试者必须针对每种癌症测试进行不同的临床测试。细胞学诊断局限于容易收集样品的癌症，并且还涵盖可以通过内窥镜或穿刺术获取样品的癌症。然而，这要求具有技能的医生在配备有适当医疗设备的设施上进行实践，并且引起受试者很大程度的痛苦。对于肿瘤标志物，使用血液，其是易于收集的样品。但是，存在需要解决的问题，例如无法检测癌症的早期阶段；即使是晚期癌症也可能不会达到很高的水平；以及由于癌症以外的疾病可能会达到很高的水平。

最近，作为具有约17-25个碱基的单链核酸的微小RNA(也称为microRNA，miRNA等)与癌症或各种疾病之间的关系引起关注。众所周知，miRNA具有调节基因表达的功能，并且据报道，其在各种疾病中的类型和表达水平从早期就发生了变化。换句话说，与健康个体相比，癌症患者中特定miRNA的量增加或减少；因此，从受试者获得的样品中关心的miRNA的量的检查成为了解受试者是否患有癌症的手段。miRNA不仅存在于从身体获得的样品(诸如组织及类似的)中，而且还存在于可以容易收集的体液(诸如，排泄到体外的尿液，血清，血浆和唾液)中。因此，容易获得的这三种类型的体液样品的使用和作为测试标志物的其量随着癌症发展而变化的miRNA的采用使癌症检测非常容易进行。此外，利用不依赖于癌症的类型而改变的标志物，可能的是在覆盖所有种类的癌症的单一测试中确定受试者是否患有癌症。如果可以在体检和综合医疗检查中在早期阶段容易且廉价地发现癌症，那么这是具有显著效果的，不仅使受试者受益，而且减少医疗费用。

引文清单

专利文献

PTL 1：日本专利No.6039656

非专利文献

NPL 1：Su YY,Sun L,Guo ZR,Li JC,Bai TT,Cai XX,Li WH,Zhu YF.J OvarianRes.2019Jan 22；12(1):6.doi:10.1186/s13048-018-0477-x。

NPL 2：Yerukala Sathipati S,Ho SY.Sci Rep.2018Oct31；8(1):16138.doi:10.1038/s41598-018-34604-3。

附图说明

图1是显示使用PCR测量从健康个体和患有各种癌症的患者获得的血清miRNA(SEQID NO：1)的量的结果的图。

图2是显示使用LAMP测量从健康个体和患有各种癌症的患者获得的血清miRNA(SEQ ID NO：1)的量的结果的图。

详细描述

实施方案提供了以miRNA为标志物提供用于癌症诊断的指标的方法及其试剂盒。

根据实施方案，具有由SEQ ID NO：1表示的核苷酸序列的miRNA被用作用于癌症诊断的标志物。