[发明专利]核酸递送载体、核酸递送载体组、核酸递送组合物和核酸递送方法

权利要求书

1.用于将第1序列整合到细胞基因组中的核酸递送载体，其中所述核酸递送载体包含：

供体DNA，其包含第1序列；

RNA剂，其至少包含编码涉及将第1序列整合到基因组中的蛋白的RNA；和

脂质粒子，其包封供体DNA和RNA剂。

2.权利要求1的核酸递送载体，其中所述供体DNA和RNA剂具有核壳结构，其中供体DNA是核，RNA剂是壳。

3.权利要求1的核酸递送载体，其中所述供体DNA和RNA剂具有核壳结构，其中RNA剂是核，供体DNA是壳。

4.权利要求1～3之任一项的核酸递送载体，其中所述蛋白是具有内切核酸酶活性的酶。

5.权利要求4的核酸递送载体，其中所述蛋白是CRISPR关联蛋白9(CAS9)。

6.权利要求5的核酸递送载体，其中所述RNA剂还包含向导RNA，所述向导RNA包含对应于整合了所述第1序列的所述基因组上的序列的序列。

7.权利要求1～3之任一项的核酸递送载体，其中所述蛋白是转座酶。

8.权利要求7的核酸递送载体，其中所述蛋白是PiggyBac、SleepingBeauty、FrogPrince、Hsma、Minos、Tol1、Tol2、Passport、hAT、Ac/Ds、PIF、Harbinger、Harbinger3-DR、Himar1、Hermes、Tc3或Mos1。

9.权利要求1～8之任一项的核酸递送载体，其中所述RNA剂还包含编码DNA甲基化蛋白的RNA，编码DNA去甲基化蛋白的RNA，编码DNA修复蛋白的RNA，和/或编码DNA结合蛋白的RNA。

10.权利要求1～9之任一项的核酸递送载体，其中所述RNA剂中所包含的RNA被修饰以对降解具有抗性。

11.权利要求1～10之任一项的核酸递送载体，其中所述供体DNA和/或RNA剂使用核酸凝缩肽凝缩。

12.权利要求1～11之任一项的核酸递送载体，其中所述脂质粒子还包含由下式表示的第1可生物降解的脂质：

Q-CHR2

其中

Q是含有2个或更多个叔氮原子的无氧含氮脂肪族基，

R各自独立地是C12～C24脂肪族基，和

至少一个R在其主链或其侧链中包含选自-C(＝O)-O-、-O-C(＝O)-、-O-C(＝O)-O-、-S-C(＝O)-、-C(＝O)-S-、-C(＝O)-NH-、及-NHC(＝O)-的连接基LR。

13.权利要求1～12之任一项的核酸递送载体，其中所述脂质粒子还包含由下式表示的第2可生物降解的脂质：

P-[X-W-Y-W'-Z]2

其中

P是在主链中含有至少一个醚键的亚烷基氧基，

X各自独立地是含有叔胺结构的2价连接基，

W各自独立地是C1～C6亚烷基，

Y各自独立地是选自单键、醚键、羧酸酯键、硫代羧酸酯键、硫代酯键、酰胺键、氨基甲酸酯键和脲键的2价连接基，

W'各自独立地是单键或C1～C6亚烷基，

Z各自独立地是脂溶性维生素残基、甾醇残基或C12～C22脂肪族烃基。

14.用于将第1序列整合到细胞基因组中的核酸递送载体组，其中所述核酸递送载体组包含：

第1载体，其包含：

供体DNA，其包含第1序列，和

第1脂质粒子，其包封所述供体DNA；和

第2载体，其包含：

RNA剂，其包含编码涉及将第1序列整合到基因组中的蛋白的RNA，和

第2脂质粒子，其包封所述RNA剂。