[发明专利]免疫球蛋白纯化方法和免疫球蛋白纯化装置、以及免疫球蛋白制造方法和免疫球蛋白制造装置

说明书

本发明提供不使抗体特性失活且免疫球蛋白的回收率高的免疫球蛋白纯化方法。免疫球蛋白纯化方法具备吸附工序和解吸工序。吸附工序是在中性缓冲液中使免疫球蛋白吸附于多孔氧化锆粒子的工序。解吸工序是利用中性解吸液使吸附于多孔氧化锆粒子的免疫球蛋白从多孔氧化锆粒子解吸的工序。

技术领域

本发明涉及免疫球蛋白纯化方法和免疫球蛋白纯化装置、以及免疫球蛋白制造方法和免疫球蛋白制造装置。

背景技术

免疫球蛋白作为治疗药、体外诊断药是有用的，预测今后需求也越来越高。为了用于这样的用途，需要开发出能够高纯度地纯化免疫球蛋白的技术。在免疫球蛋白的纯化中，通常使用利用了蛋白A的亲和层析(参考例如专利文献1)。蛋白A是对IgG显示出结合特性的、由金黄色葡萄球菌(Staphyrococal aureus)的菌体膜分离出的蛋白质。蛋白A具有与来自各种动物的免疫球蛋白特异性地结合的性质，并且每单位蛋白质的免疫球蛋白的结合量多，因此使用固定化有该蛋白A的载体的亲和层析被用在工业规模的抗体纯化工艺中。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2017-47365号公报

发明内容

发明所要解决的问题

但是，使用该蛋白A的亲和层析中，作为使吸附的免疫球蛋白溶出的方法，使用pH4以下的酸性溶液，因此，有可能抗体的高级结构发生变化，进而向缔合、凝聚发展。

另外，在细胞培养的阶段也出现了免疫球蛋白的凝聚体，含有这些免疫球蛋白的聚合物(凝聚体)的杂质难以通过使用了蛋白A的亲和层析除去。

因此，为了解决上述问题，通常使用在通过使用了蛋白A的亲和层析进行纯化后组合离子交换层析、疏水性相互作用层析的方法。

但是，在以往的离子交换层析中，只能分离免疫球蛋白的单体的条件范围窄，因此存在免疫球蛋白的回收率低的问题。另外，在疏水性相互作用层析中，免疫球蛋白的回收率低，而且需要长时间，因此存在免疫球蛋白的纯化成本高的问题。

本发明是鉴于上述实际情况而完成的，目的在于提供不使抗体特性失活且免疫球蛋白的回收率高的免疫球蛋白纯化方法和免疫球蛋白纯化装置、以及免疫球蛋白制造方法和免疫球蛋白制造装置。本发明能够通过以下方式来实现。

用于解决问题的手段

[1]一种免疫球蛋白纯化方法，其特征在于，具备：

在中性缓冲液中使免疫球蛋白吸附于多孔氧化锆粒子的吸附工序；和

利用中性解吸液使吸附于上述多孔氧化锆粒子的上述免疫球蛋白从上述多孔氧化锆粒子解吸的解吸工序。

[2]如[1]所述的免疫球蛋白纯化方法，其特征在于，上述解吸液为磷酸缓冲液。

[3]如[1]或[2]所述的免疫球蛋白纯化方法，其特征在于，上述解吸液含有选自由下述通式(1)所表示的化合物及其盐组成的组中的至少一种。

(通式(1)中，R¹为碳原子数1～10的亚烷基。另外，R²～R⁵为碳原子数1～10的亚烷基，彼此可以相同也可以不同。)

[4]一种免疫球蛋白纯化装置，其特征在于，具备：

在中性缓冲液中使免疫球蛋白吸附于多孔氧化锆粒子的吸附部；和

利用中性解吸液使吸附于上述多孔氧化锆粒子的上述免疫球蛋白从上述多孔氧化锆粒子解吸的解吸部。

[5]如[4]所述的免疫球蛋白纯化装置，其特征在于，上述解吸液为磷酸缓冲液。