[发明专利]mRNA疫苗

说明书

本发明一般涉及编码功能性免疫刺激蛋白的mRNA分子和PD‑1通路抑制剂的组合。特别地，本发明涉及一种或多种mRNA分子和PD‑1通路抑制剂的组合，所述mRNA分子编码选自包含CD40L、CD70和caTLR4的列表的至少一种功能性免疫刺激蛋白；所述PD‑1通路抑制剂任选地也呈mRNA分子的形式。本发明还涉及包含这种组合的疫苗，以及本发明的组合和疫苗在人或兽药中的用途，特别是在预防和/或治疗细胞增殖性疾病中的用途。

发明领域

本发明一般涉及编码功能性免疫刺激蛋白的mRNA分子和PD-1通路抑制剂的组合。特别地，本发明一般涉及编码功能性免疫刺激蛋白的mRNA分子和PD-1通路抑制剂的组合。特别地，本发明涉及一种或多种mRNA分子和PD-1通路抑制剂的组合，所述mRNA分子编码选自包含CD40L、CD70和caTLR4的列表的至少一种功能性免疫刺激蛋白；所述PD-1通路抑制剂任选地也呈mRNA分子的形式。本发明还涉及包含这种组合的疫苗，以及本发明的组合和疫苗在人或兽药中的用途，特别是在预防和/或治疗细胞增殖性疾病中的用途。

发明背景

诱导能够识别和杀伤癌细胞的有效的细胞毒性CD8 T细胞应答构成了任何治疗性癌症疫苗的关键目标。疫苗引发此类细胞毒性T细胞应答的能力在很大程度上由疫苗与树突状细胞(DC)之间的早期相互作用决定，树突状细胞是最有效的抗原呈递细胞和T细胞免疫的激发物。与基于蛋白质的疫苗不同，mRNA疫苗能够在DC的胞浆中表达mRNA编码的抗原，这是抗原加工和抗原呈递给CD8 T细胞的天然途径。

此外，由病毒聚合酶如T7在体外转录产生的mRNA部分类似于病毒RNA，因此被先天免疫传感器识别，赋予mRNA内在的佐剂特性(Kariko等人，2005；Yoneyama等人，2010)。尽管如此，IVT mRNA对DC的激活并不是最理想的，可以通过共同递送TriMix mRNA来进一步增强，TriMix mRNA是编码免疫刺激蛋白CD40L、CD70和caTLR4的三种mRNA的混合物(Bonehill等人，2008；Van Lint等人，2012；Van Lint等人，2016)。已证明将TriMix mRNA添加到编码肿瘤抗原的mRNA中可强烈增强T细胞应答的量级及其在临床前模型中的抗肿瘤作用，并且目前正在临床研究中进行探索。因此，发明人先前已经确定，无论是在体内还是体外，通过向APC提供编码一种或多种免疫刺激因子CD40L、CD70和caTLR4的mRNA或DNA分子的混合物形式的特异性分子佐剂，可以极大地增强APC的T细胞刺激能力。所述的用免疫刺激因子的刺激可以通过静脉内、肿瘤内、皮内、腹膜内、肌内或结内施用编码所述的一种或多种免疫刺激因子的mRNA或DNA分子和任选的肿瘤抗原mRNA、DNA或蛋白质在体内(原位)进行。所述mRNA或DNA可以是裸露的或可以如下所述被保护。当例如静脉内施用时，所述mRNA或DNA可以被保护。

PD-1基因属于免疫球蛋白超家族，编码55kDa的I型跨膜蛋白。小鼠PD-1和人PD-1均由288个氨基酸组成，并且在N端有信号肽(20个氨基酸)，中间部分有疏水区，其为跨膜区。

在胸腺中，PD-1在CD4-/CD8-到CD4+/CD8+过渡阶段在胸腺细胞上表达。在外周，PD-1在经抗原受体激活的T细胞和B细胞以及激活的骨髓髓系细胞如巨噬细胞上表达。

PD-1在其细胞内区域具有ITIM(免疫受体酪氨酸抑制基序)，因此，PD-1被认为是免疫应答中的负调节因子。